慢性壓迫后大鼠背根神經(jīng)節(jié)上TRAAK通道m(xù)RNA表達的改變.pdf

1、研究目的：建立大鼠背根神經(jīng)節(jié)慢性壓迫模型，測定慢性壓迫后背根神經(jīng)節(jié)上TRAAK通道m(xù)RNA的變化。通過測定慢性壓迫大鼠背根神經(jīng)節(jié)后同側(cè)后肢足底機械痛及熱痛閾值的變化及觀察壓迫后背根神經(jīng)節(jié)形態(tài)學(xué)的變化，驗證大鼠背根神經(jīng)節(jié)慢性壓迫模型的建立是否成功。通過測定背根神經(jīng)節(jié)上TRAAK通道的mRNA水平，觀察壓迫前后TRAAK通道的基因水平是否改變，以探討背根神經(jīng)節(jié)受壓后機體的自我神經(jīng)保護及鎮(zhèn)痛機制。 研究方法健康雄性wistar大鼠49

2、只，隨機分為空白對照組(n=7)；損傷組(n=21)；偽手術(shù)組(n=21)，其中損傷組和偽手術(shù)組各均分為10天組、20天組和30天組。從椎間外孔插入U形不銹鋼棒，使U形棒的一端進入椎管內(nèi)，壓迫背根神經(jīng)節(jié)，造成大鼠背根神經(jīng)節(jié)慢性壓迫模型。測定動物的運動功能、熱輻射刺激縮腿反應(yīng)潛伏期及機械刺激痛閾閾值，觀察損傷后不同時期(10天、20天及30天)時的動物神經(jīng)行為改變情況。于造模后10天、20天、30天取材，HE染色，光鏡下觀察背根神經(jīng)節(jié)的組

3、織形態(tài)學(xué)改變；采用RT—PCR技術(shù)結(jié)合凝膠分析系統(tǒng)，觀察損傷后不同時間背根神經(jīng)節(jié)中TRAAK通道m(xù)RNA表達的變化。 結(jié)果：①損傷組各時間段動物右后肢的熱痛和機械痛的閾值均發(fā)生改變，出現(xiàn)明顯的痛覺過敏現(xiàn)象，空白對照組及各偽手術(shù)組在各時間段熱痛及機械痛閾值均無明顯改變。②損傷后10天的病理切片顯示慢性壓迫背根神經(jīng)節(jié)已出現(xiàn)輕度的組織間隙增大、間質(zhì)血管充血、個別細(xì)胞空泡樣變性等炎癥表現(xiàn)；損傷20天時神經(jīng)節(jié)包膜明顯血管擴張、充血，間質(zhì)水

4、腫，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞有空泡狀變性，神經(jīng)纖維水腫變性，局部有少量淋巴細(xì)胞浸潤；損傷30天時神經(jīng)纖維水腫明顯減輕，但仍有神經(jīng)節(jié)細(xì)胞空泡狀變性，此時神經(jīng)外膜明顯增厚，大量纖維組織增生。而空白對照組及各偽手術(shù)組沒有病理改變。③和對照組相比，損傷后10天、20天及30天的DRG中TRAAK通道的mRNA表達均明顯高于其同時期偽手術(shù)組，分別增加了77.61％、59.61％和24.26％。 結(jié)論：大鼠背根神經(jīng)節(jié)受到慢性壓迫后可導(dǎo)致?lián)p傷側(cè)后肢產(chǎn)生感覺過