孤啡肽對大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元膜電位的影響及離子機制.pdf

1、孤啡肽(orphaninOF,OFQ)是近幾年來新發(fā)現(xiàn)的一種內(nèi)源性阿片肽，廣泛分布于中樞和外周組織，參與機體的多種生理活動。背根神經(jīng)節(jié)(dorsalrootganglion，DRG)是各種軀體感覺(也包括內(nèi)臟感覺)向中樞傳遞的初級感覺神經(jīng)元集中的部位，DRG神經(jīng)元是一類具有假單極形態(tài)特征的初級感覺神經(jīng)元，其對各種感覺傳入信息具有一定的整合作用。目前OFQ對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響已有報道，但是在外周OFQ對DRG神經(jīng)元膜的作用及對初級感覺尤以

2、痛覺傳入信息的調(diào)制作用國內(nèi)外尚未見報道。本文在離體的Wistar大鼠DRG標本上，用細胞內(nèi)微電極記錄技術(shù)研究OFQ對背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元膜的作用及作用機制。 研究方法：出生后2～3周的幼年Wistar大鼠，在乙醚麻醉下行椎板切除術(shù)，分離L4-L5的脊神經(jīng)根。將標本用細鋼針固定于記錄浴槽底部之硅膠片上，BSS灌流標本，玻璃微電極行細胞內(nèi)穿刺。應(yīng)用細胞內(nèi)微電極記錄技術(shù)，研究初級感覺神經(jīng)元上是否存在OFQ受體及OFQ對神經(jīng)元膜電位的影響，

3、并用離子置代及通道阻斷劑對其作用機制進行研究。 結(jié)果：受檢的271個神經(jīng)元，靜息膜電位-45.22±7.63mV(n=271)，當加3×10-7～10-10mol/LOFQ時可觀察到如下三種膜電位變化：(1)超極化反應(yīng)；(2)去極化反應(yīng)；(3)雙相反應(yīng)。實驗中還觀察到膜電位無反應(yīng)的現(xiàn)象，其未列入受檢細胞個數(shù)中。用Nphe(3×10-7～10-8mol/L)灌流標本，基本可以阻斷OFQ引起的膜電位變化。用含阿片受體非選擇性阻斷劑納

4、絡(luò)酮(Naloxone)的BSS灌流標本，對OFQ引起的去極化無影響，但可阻斷OFQ引起的超極化反應(yīng)。BSS中NaCl以氯化膽堿(cholinechloride，CH-CL)置代，對OFQ引起的膜電位無影響。用含氯化鋇(bariumchloride，BaCl2)的BSS灌流時能使OFQ去極化反應(yīng)幅值減少和超極化反應(yīng)幅值無變化。用含四乙基碘化銨(etraethylammoniumchloride，TEA)的BSS灌流時能使OFQ引起的去極

5、化和超極化幅值減小。用含4-氨基吡啶(4-Aminopyridine，4-AP)，格列本脲(Glibenclamide，GLIB)及蜂毒(Apamin)的BSS灌流標本，對OFQ引起的膜電位改變無影響。分別用含氯化鎘(cadmiumchloride，CdCl2)，尼莫地平(Nimodipine)，去鈣(0mmol/L)和高鈣(20mmol/L)對OFQ引起的膜電位變化均無影響。 結(jié)論：OFQ本身就是阿片肽家族中的一員，其受體后作

6、用也與阿片系統(tǒng)相似，能夠抑制腺苷酸環(huán)化酶，增加鉀通道電導(dǎo)，降低鈣通道電導(dǎo)。目前國內(nèi)外很多資料表明，OFQ在痛和鎮(zhèn)痛方面具有重要作用，它的研究已經(jīng)成為神經(jīng)科學(xué)研究的熱點之一。本實驗應(yīng)用細胞內(nèi)微電極記錄技術(shù)研究，結(jié)果顯示： 1.DRG標本上存在ORL1受體，OFQ與ORL1受體結(jié)合從而調(diào)制DRG神經(jīng)元膜電位。 2.OFQ引起DRG神經(jīng)元膜電位的多樣性變化，產(chǎn)生去極化反應(yīng)，超極化反應(yīng)和雙相反應(yīng)。 3.OFQ引起的DRG