阿霉素對原代培養(yǎng)大鼠背根神經(jīng)節(jié)細胞作用機制的研究.pdf

1、目的：在原代培養(yǎng)大鼠背根神經(jīng)節(jié)細胞的基礎(chǔ)上，將不同劑量阿霉素作用于DRG細胞，觀察其作用并對其作用機制進行初步探討。 方法：用DMEM/F12血清培養(yǎng)基純化培養(yǎng)新生SD大鼠背根神經(jīng)節(jié)細胞，接種后培養(yǎng)7天，NSE染色進行神經(jīng)元純度鑒定后隨機分為正常對照組和不同阿霉素濃度組，根據(jù)阿霉素劑量不同分為ADM：0.5mg/L；ADM：1.0mg/L；ADM：2.0mg/L；ADM：5.0mg/L；ADM：10mg/L)。各實驗組阿霉素作用

2、時間為4小時，對照組換用無血清培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)4小時。鏡下觀察細胞的形態(tài)學(xué)變化，TUNEL法檢測細胞凋亡率。在上述實驗基礎(chǔ)上，再分別測定加入藥物前后背根神經(jīng)節(jié)細胞MTT代謝率、乳酸脫氫酶(LDH)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的變化。 結(jié)果：(1)原代培養(yǎng)的大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細胞生長狀態(tài)正常，有神經(jīng)突起生長和標記蛋白的表達，可達到90％左右的純度。(2)阿霉素實驗組的DRG細胞凋亡率與對照組相比有顯著差

3、異性(P<0.05)，阿霉素實驗組中隨著藥物濃度的增加凋亡率逐漸升高，但在ADM10m/L組中，細胞的凋亡率降低，而且出現(xiàn)了壞死細胞。3)阿霉素實驗組的MTT代謝率、LDH活性、SOD活性和MDA含量與對照組相比有顯著性差異(P<0.05)，阿霉素使背根神經(jīng)節(jié)細胞的LDH活性、MDA含量增加，同時降低了MTT代謝率、SOD活性。阿霉素對MTT代謝率、LDH活性、SOD活性和MDA含量的影響具有劑量依賴性趨勢。 結(jié)論：阿霉素對原代