嗜肺軍團(tuán)菌高溫脅迫反應(yīng)相關(guān)基因的篩選.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、嗜肺軍團(tuán)菌(L.pneumophila)是一種在水環(huán)境中普遍存在的革蘭氏陰性細(xì)菌，能夠在水中長期存活，并能適應(yīng)高水溫的環(huán)境。在適當(dāng)?shù)臈l件下可以進(jìn)入宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行胞內(nèi)增殖，對人體肺部的侵染能夠?qū)е乱环N名為“軍團(tuán)病”的非典型肺炎。本研究首先構(gòu)建了缺乏啟動子的以gfpmut2為報告基因的質(zhì)粒載體pBG01，并在此基礎(chǔ)上構(gòu)建軍團(tuán)菌基因組的啟動子文庫。然后以42℃為高溫脅迫反應(yīng)條件，篩選被抑制或者被誘導(dǎo)表達(dá)的啟動子片段，經(jīng)過多輪篩選，一共獲得7個

2、候選轉(zhuǎn)化子。通過從L.pneumophila的基因組序列中搜索分析，選擇其中的flgM鞭毛合成的負(fù)調(diào)控因子(anti-sigma28因子)進(jìn)行了初步的分析。用相關(guān)的軟件分析、預(yù)測其啟動子序列的特征，并將L.pneumophila與其他病原菌中的FlgM氨基酸序列進(jìn)行比對，分析其保守區(qū)域。FlgM調(diào)控FliA(sigma28因子)的機(jī)制在沙門氏菌等病原菌中研究比較深入，但在軍團(tuán)菌中尚未有相關(guān)報道。本研究結(jié)果顯示，當(dāng)溫度從37℃上升到42℃

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