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文檔簡介
1、目的:阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s disease,AD)是一種老化相關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,截止到目前為止其發(fā)生的根本分子機制仍不清楚。越來越多的實驗證據(jù)表明線粒體功能障礙是AD發(fā)生的重要原因之一。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸依賴的去乙?;?(NAD-dependent protein deacetylase sirtuin-3,Sirt3)是去乙?;讣易宓某蓡T之一,其調(diào)控線粒體功能也抑制線粒體相關(guān)的生物學(xué)進(jìn)程。本實驗中,我們主要
2、探討了線粒體Sirt3在APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因模型小鼠中的表達(dá)情況。
方法:水迷宮實驗用于檢測APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠的空間學(xué)習(xí)和記憶能力。實時熒光定量PCR和Western blotting兩種方法分別從轉(zhuǎn)錄和翻譯水平來檢測Sirt3的表達(dá)水平。年齡和性別相匹配的同窩野生型C57小鼠作為實驗對照組。免疫組化顯示Sirt3蛋白在腦組織中的定位。
結(jié)果:APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因模型小鼠皮質(zhì)中Sirt3的mRNA水平明顯
3、低于同窩野生型C57小鼠(0.83±0.24 vs.1.10±0.21,P<0.05)。Western blotting檢測中發(fā)現(xiàn)相似的Sirt3水平的表達(dá)下降,其APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠平均光密度值(MOD)為0.77±0.11,同窩野生型C57小鼠為1.34±0.17,P<0.01。免疫組化結(jié)果顯示Sirt3定位于腦組織細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞漿,同時其半定量結(jié)果顯示與Western blotting一致,實驗組和對照組的MOD數(shù)據(jù)分別
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