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文檔簡介
1、目的:急性心肌梗死(AMI)是心肌缺血性壞死,目前,治療AMI會導(dǎo)致心肌缺血再灌注損傷(MIRI),構(gòu)建在體大鼠急性心肌I/R模型,觀察靜脈應(yīng)用堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)對心肌缺血再灌注大鼠心功能及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)蛋白表達的影響。
方法:取雄性Wistar大鼠(250g-300g)80只,隨機分為5組:1、假手術(shù)(sham,n=16)組;2、缺血再灌注(I/R組, n=16);3、I/R+bFGF50(bF
2、GF50:50μg/kg尾靜脈注射, n=16)組;4、I/R+bFGF100(bFGF100:100μg/kg經(jīng)尾靜脈注射, n=16)組;5、I/R+bFGF200(bFGF200:200μg/kg經(jīng)尾靜脈注射, n=16)組。I/R組為結(jié)扎前降支(LAD)30min,再灌注4h。I/R+bFGF組在心臟LAD結(jié)扎30min后,于再灌注前10min經(jīng)尾靜脈注射bFGF,bFGF溶于0.5ml生理鹽水。sham組只放置結(jié)扎線,不結(jié)扎L
3、AD血管。模型建立后,進行下述實驗:1、分別在再灌注4h后,每一組取出8只大鼠頸椎脫臼處死,取出心臟,中性福爾馬林固定后12h,制作蠟塊,用檢測心肌組織細胞凋亡的TUNEL法檢測各組大鼠細胞凋亡率。2、各組剩余的8只大鼠繼續(xù)飼養(yǎng)4周,心臟超聲觀察各組大鼠心功能參數(shù);Western blot法定量各組大鼠心肌組織VEGF的表達量;Masson染色測定各組大鼠心肌纖維化的程度。
結(jié)果:1、I/R組大鼠12只(75%)發(fā)生室性心律失
4、常,4只(25%)發(fā)生心室顫動。bFGF干預(yù)各組室性心律失常的發(fā)生率低于I/R組(均p<0.05),I/R+bFGF50組12只(75%)出現(xiàn)室性心律失常,2只(12.5%)發(fā)生心室顫動;I/R+bFGF100組10只(62.5%)出現(xiàn)室性心律失常,2只(12.5%)發(fā)生心室顫動;I/R+bFGF100組10只(62.5%)出現(xiàn)室性心律失常,2只(12.5%)發(fā)生心室顫動;I/R+bFGF200組6只(37.5%)出現(xiàn)室性心律失常,1只
5、(6.25%)發(fā)生心室顫動。bFGF干預(yù)組存活率為62.5%,I/R組存活率為32%。表明bFGF干預(yù)可以減少I/R大鼠室性心律失常的發(fā)生。2、I/R組心肌細胞凋亡率顯著高于sham組[(29.09±2.41)%/(5.43±1.58)%, p<0.05];與I/R組[(29.09±2.41)%]相比,I/R+bFGF50、I/R+bFGF100和I/R+bFGF200各組心肌細胞凋亡率分別為[(24.90±4.43)%、(16.04±
6、1.99)%和(13.39±1.64)%,均 p<0.05]有所下降;與I/R+bFGF50組相比,I/R+bFGF100、I/R+bFGF200組心肌細胞凋亡率明顯下降(p<0.05);I/R+bFGF200組心肌細胞凋亡率低于I/R+bFGF100組(p<0.05);可見bFGF可以抑制心肌細胞凋亡,并且與bFGF的劑量相關(guān),bFGF劑量越高,細胞凋亡率越低。3、各組心功能參數(shù)的變化:和sham組,左室射血分數(shù)(LVEF)[(81.
7、90±7.13)%]相比,I/R組和bFGF各處理LVEF分別[(49.10±6.36)%,(55.6±6.22)%,(69.8±4.25)%,(77.37±5.69%),均p<0.05]有所下降;與I/R組[(49.10±6.36)%]相比,I/R+bFGF100, I/R+bFGF200組LVEF分別[(69.8±4.25)%,(77.37±5.69)%,均p<0.05]有所好轉(zhuǎn);I/R+bFGF200與 I/R+bFGF100組相
8、比, LVEF[(77.37±5.69)%/(69.8±4.25)%, p<0.05]??梢奲FGF對LVEF的影響具有劑量依賴性,劑量越高改善越明顯。與sham組左室收縮末期內(nèi)徑(LVIDs)[(4.11±0.85)mm]相比,I/R組和bFGF各處理組LVIDs分別為[(6.28±0.64)mm,(5.89±0.59)mm,(5.55±1.13)mm,(4.48±0.60)mm,均p<0.05]有所增大;與I/R組[(6.28±0.
9、64)mm]相比,各bFGF處理組LVIDs分別為[(5.89±0.59)mm,(5.55±1.13)mm,(4.48±0.60)mm,均p<0.05]逐漸減??;與I/R+bFGF50組[(5.89±0.59)mm]相比,I/R+bFGF100,I/R+bFGF200處理組分別為[(5.55±1.13)mm,(4.48±0.60)mm, p<0.05]均降低。與sham組左室舒張末期內(nèi)徑(LVIDd)[(4.04±0.28)mm]相比,
10、I/R組和bFGF各處理組LVIDd分別為[(6.73±0.78mm)(6.61±0.85)mm,(6.21±1.00)mm,(5.07±0.64)mm,均p<0.05]有所增高;與I/R組[(6.73±0.78)mm]相比,I/R+bFGF100,I/R+bFGF200組LVIDd分別為[(6.21±1.00)mm,(5.07±0.64)mm,p<0.05]降低;I/R+bFGF200與I/R+bFGF100組相比,[(5.07±0.
11、64)mm/(6.21±1.00)mm,p<0.05]也有所降低??梢婋S著bFGF劑量的增加可以逐漸改善左室功能。4、心肌組織VEGF蛋白表達的比較:與sham組比較,I/R組、I/R+ bFGF50組、I/R+bFGF100組和I/R+bFGF200組VEGF蛋白的表達顯著增加(均p<0.05);與I/R組相比,I/R+bFGF50組,I/R+bFGF100組和I/R+bFGF200組VEGF蛋白的表達增加(均p<0.05);與I/R
12、+bFGF50組相比,I/R+bFGF100組和I/R+bFGF200組VEGF蛋白的表達增加(p<0.05);I/R+bFGF200組和I/R+bFGF100組相比,VEGF表達增強(p<0.05)??梢奲FGF能增加心肌組織中VEGF蛋白的表達,并具有劑量依賴性。5、各組心肌纖維化程度(心肌膠原容積分數(shù)(CVF)的比較:與sham組CVF[(1.29±0.71)%]比較,I/R組、I/R+ bFGF各組CVF分別為[(45.51±3
13、.92)%,(21.56±1.79)%,(15.61±1.45)%,(9.76±1.19)%,均p<0.05]心肌纖維化程度顯著加重;與I/R組[(45.51±3.92)%]相比,I/R+bFGF各組,分別為[(21.56±1.79)%,(15.61±1.45)%,(9.76±1.19)%,均p<0.05]纖維化顯著減少;與I/R+bFGF50組相比,I/R+bFGF100組和I/R+bFGF200組纖維化程度明顯減輕。
結(jié)論
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