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文檔簡介
1、本實驗主要研究過量表達sfrp3對小鼠早期牙齒發(fā)育的影響,以期更深入的了解Wnt信號在牙間充質誘導牙齒發(fā)育能力中所起的作用。Wnt基因家族中的許多基因及其拮抗物和受體均在牙胚中表達,這表明Wnt信號在牙齒發(fā)育的起始階段可能有重要的作用。sFRPs是新發(fā)現的蛋白質因子,在功能上sFRPs似乎是作為Wnt信號的調控因子,不同的sFRPs與不同的Wnt配基結合來調控Wnt信號。前期研究發(fā)現,在早期牙齒發(fā)育階段,sfrp3和Wnt5a在磨牙間充
2、質中都有表達。而研究基因的功能最為常用的方法為功能缺失和獲得,即基因剔除、RNAi、過量表達等方法。在此我們以慢性病毒(HIV-1)作為載體在磨牙問充質中過量表達sfrp3,作為Wnt信號的競爭性抑制劑來阻斷Wnt信號的傳導。主要研究工作包括:pNL-IRES<,2>-EGFP-sfrp3 重組子的構建,慢性病毒的生產,慢性病毒感染磨牙間充質細胞過量表達sfrp3。實驗結果表明,以EGFP作為報告基因發(fā)現慢性病毒對牙間充質細胞有高達56
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