四氫嘧啶對人冰凍紅細胞影響的初步研究.pdf

1、目的:紅細胞是血液中主要成分之一，具有運輸氧氣和二氧化碳的作用。一次性大量失血、嚴重貧血或嚴重感染的手術(shù)前等情況需要輸注紅細胞，因而臨床上對血液的需求大。血液離體后的保存效果或時間，對臨床用血及安全具有重要的作用。紅細胞的冰凍保存是一種離體后有效的保存辦法。目前以高濃度甘油作為冰凍紅細胞的主要保護劑。高濃度甘油溶液具有很高的滲透壓且對細胞無維持穩(wěn)定的作用，用此甘油化細胞時，需要調(diào)節(jié)細胞的滲透壓及維持細胞正常形態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)，嗜鹽菌和耐鹽菌

2、內(nèi)的四氫嘧啶(ectoine)，可調(diào)節(jié)細菌的滲透壓。本研究根據(jù)目前的研究進展，推測使用高濃度甘油對紅細胞作用時，四氫嘧啶可對滲透壓起調(diào)節(jié)作用。
　　研究ectoine對紅細胞滲透壓的影響;研究ectoine作為滲透壓調(diào)節(jié)物，應用于冰凍紅細胞后，對紅細胞質(zhì)量的影響。
　　方法:1）闡述紅細胞在等滲ectoine、等滲乳酸鈉、生理鹽水、超純水和等滲甘油中的吸光度動力學，研究ectoine對紅細胞滲透壓的影響。2）探索使用57％甘

3、油(w/v)作為深低溫保護劑時，冰凍并解凍紅細胞的步驟，從而確定高濃度甘油冰凍紅細胞的實驗方法;使用不同濃度(1.5％、3.0％、4.5％，均為w/v)ectoine與57％甘油(w/v)聯(lián)用作為實驗組、國內(nèi)商品化的復方甘油為對照組，冰凍紅細胞，測定冰凍前后實驗組和對照組細胞的回收率、變形性、滲透脆性、三磷酸腺苷(ATP)含量、果糖-6磷酸激酶(PFK)活力、丙酮酸激酶(PK)活力及乳酸脫氫酶(LDH)活力指標，初步研究ectoine與

4、甘油聯(lián)用冰凍紅細胞，對紅細胞質(zhì)量的影響。
　　結(jié)果:紅細胞在等滲ectoine、等滲乳酸鈉和生理鹽水中的吸光度動力學相似，得出ectoine與乳酸鈉和氯化鈉相似，可調(diào)節(jié)滲透壓;紅細胞在超純水和等滲甘油的吸光度動力學相似，證實溶液中甘油不可維持細胞膜穩(wěn)定。3.0％ectoine與甘油聯(lián)用與國內(nèi)商品化的復方甘油冰凍后的紅細胞相比，在回收率、滲透脆性、ATP含量、PK活力及LDH活力上，差異具有統(tǒng)計學意義;Ectoine與甘油聯(lián)用冰凍紅