四氫嘧啶對(duì)人冰凍紅細(xì)胞影響的初步研究.pdf

1、目的:紅細(xì)胞是血液中主要成分之一，具有運(yùn)輸氧氣和二氧化碳的作用。一次性大量失血、嚴(yán)重貧血或嚴(yán)重感染的手術(shù)前等情況需要輸注紅細(xì)胞，因而臨床上對(duì)血液的需求大。血液離體后的保存效果或時(shí)間，對(duì)臨床用血及安全具有重要的作用。紅細(xì)胞的冰凍保存是一種離體后有效的保存辦法。目前以高濃度甘油作為冰凍紅細(xì)胞的主要保護(hù)劑。高濃度甘油溶液具有很高的滲透壓且對(duì)細(xì)胞無維持穩(wěn)定的作用，用此甘油化細(xì)胞時(shí)，需要調(diào)節(jié)細(xì)胞的滲透壓及維持細(xì)胞正常形態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)，嗜鹽菌和耐鹽菌

2、內(nèi)的四氫嘧啶(ectoine)，可調(diào)節(jié)細(xì)菌的滲透壓。本研究根據(jù)目前的研究進(jìn)展，推測使用高濃度甘油對(duì)紅細(xì)胞作用時(shí)，四氫嘧啶可對(duì)滲透壓起調(diào)節(jié)作用。
　　研究ectoine對(duì)紅細(xì)胞滲透壓的影響;研究ectoine作為滲透壓調(diào)節(jié)物，應(yīng)用于冰凍紅細(xì)胞后，對(duì)紅細(xì)胞質(zhì)量的影響。
　　方法:1）闡述紅細(xì)胞在等滲ectoine、等滲乳酸鈉、生理鹽水、超純水和等滲甘油中的吸光度動(dòng)力學(xué)，研究ectoine對(duì)紅細(xì)胞滲透壓的影響。2）探索使用57％甘

3、油(w/v)作為深低溫保護(hù)劑時(shí)，冰凍并解凍紅細(xì)胞的步驟，從而確定高濃度甘油冰凍紅細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法;使用不同濃度(1.5％、3.0％、4.5％，均為w/v)ectoine與57％甘油(w/v)聯(lián)用作為實(shí)驗(yàn)組、國內(nèi)商品化的復(fù)方甘油為對(duì)照組，冰凍紅細(xì)胞，測定冰凍前后實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞的回收率、變形性、滲透脆性、三磷酸腺苷(ATP)含量、果糖-6磷酸激酶(PFK)活力、丙酮酸激酶(PK)活力及乳酸脫氫酶(LDH)活力指標(biāo)，初步研究ectoine與

4、甘油聯(lián)用冰凍紅細(xì)胞，對(duì)紅細(xì)胞質(zhì)量的影響。
　　結(jié)果:紅細(xì)胞在等滲ectoine、等滲乳酸鈉和生理鹽水中的吸光度動(dòng)力學(xué)相似，得出ectoine與乳酸鈉和氯化鈉相似，可調(diào)節(jié)滲透壓;紅細(xì)胞在超純水和等滲甘油的吸光度動(dòng)力學(xué)相似，證實(shí)溶液中甘油不可維持細(xì)胞膜穩(wěn)定。3.0％ectoine與甘油聯(lián)用與國內(nèi)商品化的復(fù)方甘油冰凍后的紅細(xì)胞相比，在回收率、滲透脆性、ATP含量、PK活力及LDH活力上，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Ectoine與甘油聯(lián)用冰凍紅