β-谷甾醇對(duì)人肺癌細(xì)胞增殖、凋亡影響的初步研究.pdf

1、目的：肺癌是世界范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤。其中非小細(xì)胞型肺癌占肺癌總數(shù)的75％-80%，絕大部分患者確診時(shí)已為中晚期。國內(nèi)外多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，植物化學(xué)物對(duì)多種腫瘤具有化學(xué)預(yù)防作用，本研究以β-谷甾醇為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，研究它在體外條件下對(duì)肺癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響。
　　方法：不同濃度β-谷甾醇（0、5、10、20、40μM）處理人肺癌A549、NCI-H460細(xì)胞24h后，采用細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒（Cell Counting Kit-

2、8， CCK-8）檢測(cè)β-谷甾醇對(duì)細(xì)胞活性的影響；Annexin V-FITC/PI雙染結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)（Flow cytometer，F(xiàn)CM）檢測(cè)不同濃度β-谷甾醇（0、2.5、10、40μM）作用下A549細(xì)胞周期分布的影響，Real-Time PCR檢測(cè)周期相關(guān)基因Cyclin B1、Cdk1、Cdc25C的變化；以上同樣實(shí)驗(yàn)條件下，F(xiàn)CM分析β-谷甾醇對(duì)A549細(xì)胞凋亡率的變化，Western Blotting檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白p5

3、3、Bax和Bcl-2的變化。
　　結(jié)果：β-谷甾醇以劑量依賴性方式明顯抑制A549細(xì)胞的生長，與對(duì)照組相比存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01），對(duì)NCI-H460亦有細(xì)胞活性抑制作用（P＜0.05）；流式結(jié)果分析表明β-谷甾醇作用A549細(xì)胞24h后，細(xì)胞周期各期均出現(xiàn)不同程度的變化，但與對(duì)照組相比G2/M期的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P＜0.05)，而G0/G1和S期未見明顯變化，同時(shí)Cdc25C、Cyclin B1、CDK1 mRN