白藜蘆醇對人子宮內(nèi)膜癌細胞系A(chǔ)N3CA增殖、凋亡、遷移的影響及其機制初步研究.pdf

1、目的：研究白藜蘆醇（resveratrol，Res）對體外培養(yǎng)人子宮內(nèi)膜癌AN3CA 細胞的增殖、凋亡和遷移的作用及其可能存在的機制進行初步探討。
　　 方法：將不同濃度Res（0、12.5、25、50、100、200μmol/l）作用于AN3CA 細胞不同時間（12、24、48、72h），應用MTT 法檢測Res 對細胞增殖的影響；應用倒置相差顯微鏡觀察Res 作用后細胞形態(tài)學的改變；應用流式細胞術(shù)檢測分析Res 對細胞周期分

2、布和凋亡的影響；應用細胞劃痕實驗檢測Res 對細胞遷移的影響；應用熒光實時定量PCR 檢測Res 處理細胞后Bcl-2、Bax 和MMP-9 mRNA 的表達水平；應用Western Blot 法檢測Res 處理細胞后PCNA、Bcl-2、Bax、ERK1/2 和p-ERK1/2蛋白表達水平。
　　 結(jié)果：⑴Res 能明顯抑制AN3CA 細胞增殖，并隨著藥物濃度升高和作用時間的延長而抑制作用增強，呈時間-劑量依賴性。⑵倒置相差顯

3、微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)Res 處理組細胞生長明顯受到抑制，細胞形態(tài)變圓，胞漿內(nèi)顆粒增多增粗。⑶不同濃度Res 處理AN3CA 細胞，隨著藥物濃度升高G0/G1 期比例顯著增加從45.374±1.089％上升至72.486％±2.123％，同時伴隨S 期細胞數(shù)的減少（P <0.01）；細胞凋亡率從2.42±0.635％上升至30.96％±2.041％（P <0.01），差異有統(tǒng)計學意義。⑷細胞劃痕實驗顯微鏡下顯示Res 使AN3CA 細胞遷移運動

4、力減弱。⑸與對照組比較，Res 能夠下調(diào)Bcl-2 的mRNA 表達，上調(diào)Bax 的mRNA 表達，而MMP-9 的mRNA 表達未見改變。⑹Res 能夠增加Bax 的蛋白表達，抑制PCNA，Bcl-2 和p-ERK 在蛋白水平的表達；在短時間內(nèi)（0.5-1h），100μmol/l Res 能夠激活ERK1/2 的磷酸化表達但隨著作用時間延長（4-48h）其表現(xiàn)為抑制效應。
　　 結(jié)論：Res 能夠抑制AN3CA 細胞增殖、遷移