莪術醇對人胃癌細胞增殖、凋亡的影響及其機制的初步研究.pdf

1、目的：
　　 研究莪術醇(curcumol)對人胃癌細胞SGC7901增殖、凋亡的影響，并初步探討其作用機制。
　　 研究對象：
　　 人胃癌細胞SGC7901
　　 方法：
　　 將莪術醇溶于無水乙醇，初始濃度為5mg/mL。設實驗1、2、3、4、5組，莪術醇的濃度分別是5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL(實驗組無水乙醇的濃度為1％)，以含1％無水乙醇的

2、培養(yǎng)液為對照組。作用48h后，采用臺盼藍(Trypan blue)拒染法檢測SGC7901細胞活性，噻唑藍(MTT)法檢測莪術醇對SGC7901細胞生長的抑制率；流式細胞儀檢測莪術醇對SGC7901細胞凋亡率的影響；免疫印跡法(Western Blot)檢測莪術醇作用SGC7901細胞后其凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達情況；Western Blot檢測MAPK/ERK和PI3K/AKT信號傳導通路中ERK、AKT和其磷酸化形式p-ER

3、K、p-AKT蛋白的表達量。
　　 結果：
　　 1、經(jīng)顯微鏡下細胞計數(shù)板計數(shù)臺盼藍染色，SGC7901細胞活細胞率大于90％，活性滿足實驗要求。5μg/mL莪術醇實驗組的增殖抑制活性很小，其抑制率與對照組比較無顯著性差異(P>0.05)；而10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL莪術醇實驗組與對照組比較有顯著性差異(P<0.05)，其增殖抑制活性隨藥物濃度的增加而逐漸增強。
　　 2、20

4、μg/mL、40μg/mL、80μg/mL莪術醇能夠誘導細胞發(fā)生凋亡，隨著莪術醇作用濃度的增加，SGC7901細胞發(fā)生凋亡的比例逐漸增加，與對照組比較，有顯著性差異(P<0.05)，而5μg/mL、10μg/mL莪術醇實驗組對細胞凋亡影響不明顯(P>0.05)。
　　 3、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL莪術醇作用細胞后，以濃度依賴性方式，使Bax蛋白表達均有不同水平的上調(diào)，Bcl-2蛋白表達均有不同水平的下調(diào)，與

5、對照組比較有顯著性差異(P<0.05)，濃度5μg/mL、10μg/mL莪術醇實驗組與對照組比較無顯著性差異(P>0.05)。
　　 4、與對照組比較，實驗組ERK、AKT表達量均無明顯差異(P>0.05)；當莪術醇濃度達到20μg/mL時，實驗組p-ERK和p-AKT表達低于對照組，兩者比較有顯著性差異(P<0.05)，同時隨著莪術醇濃度的增加，抑制p-ERK、p-AKT表達的作用逐漸增強。
　　 結論：
　　

6、 1、20μg/mL～80μg/mL莪術醇能夠抑制人胃癌SGC7901細胞的增殖，同時通過調(diào)節(jié)凋亡蛋白的表達，誘導人胃癌細胞SGC7901凋亡，研究結果初步表明莪術醇通過調(diào)節(jié)SGC7901細胞增殖及凋亡的平衡，從而達到抗腫瘤作用。
　　 2、20μg/mL～80μg/mL莪術醇能夠抑制人胃癌細胞SGC7901細胞MAPK/ERK和PI3K/AKT信號傳導通路激活，實驗結果初步顯示莪術醇通過調(diào)節(jié)人胃癌SGC7901細胞信號通路的傳