莪術(shù)醇對(duì)人胃癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：
　　 研究莪術(shù)醇(curcumol)對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC7901增殖、凋亡的影響，并初步探討其作用機(jī)制。
　　 研究對(duì)象：
　　 人胃癌細(xì)胞SGC7901
　　 方法：
　　 將莪術(shù)醇溶于無水乙醇，初始濃度為5mg/mL。設(shè)實(shí)驗(yàn)1、2、3、4、5組，莪術(shù)醇的濃度分別是5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL(實(shí)驗(yàn)組無水乙醇的濃度為1％)，以含1％無水乙醇的

2、培養(yǎng)液為對(duì)照組。作用48h后，采用臺(tái)盼藍(lán)(Trypan blue)拒染法檢測(cè)SGC7901細(xì)胞活性，噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)莪術(shù)醇對(duì)SGC7901細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率；流式細(xì)胞儀檢測(cè)莪術(shù)醇對(duì)SGC7901細(xì)胞凋亡率的影響；免疫印跡法(Western Blot)檢測(cè)莪術(shù)醇作用SGC7901細(xì)胞后其凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)情況；Western Blot檢測(cè)MAPK/ERK和PI3K/AKT信號(hào)傳導(dǎo)通路中ERK、AKT和其磷酸化形式p-ER

3、K、p-AKT蛋白的表達(dá)量。
　　 結(jié)果：
　　 1、經(jīng)顯微鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)臺(tái)盼藍(lán)染色，SGC7901細(xì)胞活細(xì)胞率大于90％，活性滿足實(shí)驗(yàn)要求。5μg/mL莪術(shù)醇實(shí)驗(yàn)組的增殖抑制活性很小，其抑制率與對(duì)照組比較無顯著性差異(P>0.05)；而10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL莪術(shù)醇實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05)，其增殖抑制活性隨藥物濃度的增加而逐漸增強(qiáng)。
　　 2、20

4、μg/mL、40μg/mL、80μg/mL莪術(shù)醇能夠誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡，隨著莪術(shù)醇作用濃度的增加，SGC7901細(xì)胞發(fā)生凋亡的比例逐漸增加，與對(duì)照組比較，有顯著性差異(P<0.05)，而5μg/mL、10μg/mL莪術(shù)醇實(shí)驗(yàn)組對(duì)細(xì)胞凋亡影響不明顯(P>0.05)。
　　 3、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL莪術(shù)醇作用細(xì)胞后，以濃度依賴性方式，使Bax蛋白表達(dá)均有不同水平的上調(diào)，Bcl-2蛋白表達(dá)均有不同水平的下調(diào)，與

5、對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05)，濃度5μg/mL、10μg/mL莪術(shù)醇實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較無顯著性差異(P>0.05)。
　　 4、與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組ERK、AKT表達(dá)量均無明顯差異(P>0.05)；當(dāng)莪術(shù)醇濃度達(dá)到20μg/mL時(shí)，實(shí)驗(yàn)組p-ERK和p-AKT表達(dá)低于對(duì)照組，兩者比較有顯著性差異(P<0.05)，同時(shí)隨著莪術(shù)醇濃度的增加，抑制p-ERK、p-AKT表達(dá)的作用逐漸增強(qiáng)。
　　 結(jié)論：
　　

6、 1、20μg/mL～80μg/mL莪術(shù)醇能夠抑制人胃癌SGC7901細(xì)胞的增殖，同時(shí)通過調(diào)節(jié)凋亡蛋白的表達(dá)，誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞SGC7901凋亡，研究結(jié)果初步表明莪術(shù)醇通過調(diào)節(jié)SGC7901細(xì)胞增殖及凋亡的平衡，從而達(dá)到抗腫瘤作用。
　　 2、20μg/mL～80μg/mL莪術(shù)醇能夠抑制人胃癌細(xì)胞SGC7901細(xì)胞MAPK/ERK和PI3K/AKT信號(hào)傳導(dǎo)通路激活，實(shí)驗(yàn)結(jié)果初步顯示莪術(shù)醇通過調(diào)節(jié)人胃癌SGC7901細(xì)胞信號(hào)通路的傳