古日古木單、復(fù)方對四氯化碳致大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：研究古日古木單、復(fù)方對四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)致大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用，并研討藥物對凋亡通路相關(guān)因子的影響。
　　方法：Wistar雄性大鼠150只隨機(jī)分為9組：正常對照組、水飛薊賓陽性對照組及古日古木單、復(fù)方的高、低劑量組各10只，古日古木單、復(fù)方中劑量組及CCl4急性肝損傷模型組各30只。造模方式為水飛薊賓按照0.1g/kg濃度灌胃給藥，古日古木單、復(fù)方的高、中、低劑量組分別以1g

2、/kg、0.5g/kg、0.25g/kg濃度灌胃給藥，持續(xù)給藥8天，第8天給藥后1h，除空白對照組外各組大鼠一次性腹腔注射1mL/kg CCl4花生油溶液致急性肝損傷模型，空白組注射同劑量的花生油。處死前24h禁食不禁水，分別于CCl4染毒后24h、48h、72h處死動物。取血，分離血清測谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine Aminotransferase,ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate transaminase,AST)、堿性磷酸酶

3、(Alkaline Phosphatase,ALP)、谷胱甘肽（Glutathione,GSH）和總蛋白（Total Protein,TP）。肝臟組織分別作HE染色進(jìn)行病理組織學(xué)檢查、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）含量和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）活力測定、流式細(xì)胞術(shù)檢測肝細(xì)胞凋亡，提取肝組織蛋白，運用Western Blot法測定凋亡相關(guān)蛋白的Bax、Bcl-2及Caspase-

4、3表達(dá)。
　　結(jié)果：1.急性損傷后24h，模型組血清ALT、AST、ALP及肝臟MDA活性明顯升高，GSH、SOD水平顯著下降（P<0.01）；古日古木復(fù)方各組均能明顯降低血清ALT水平（P<0.01），古日古木單方各組也能使血清ALT水平降低（P<0.05），古日古木單、復(fù)方各組均能顯著減少血清AST水平（P<0.05），復(fù)方高劑量和單方低劑量能明顯降低ALP水平（P<0.05），古日古木復(fù)方各組及單方低劑量組能顯著提高GSH水

5、平（P<0.01），復(fù)方高劑量組能夠顯著的降低肝組織中MDA活性（P<0.01），單方低劑量組也使MDA活性明顯下降（P<0.05），古日古木復(fù)方中劑量組在損傷后48h仍能降低ALT、AST、MDA水平（P<0.05）從而促進(jìn)肝損傷修復(fù)，損傷后72h各組均恢復(fù)近正常血清或肝臟酶水平；2.急性損傷后24h，模型組中央靜脈周圍多數(shù)融合壞死，易見凋亡小體，伴混合性炎細(xì)胞浸潤，竇細(xì)胞反應(yīng)活躍，此病變?yōu)橹囟刃∪~性肝炎，而古日古木單、復(fù)方均能不同程

6、度地減少凋亡小體和小壞死灶，在損傷后48h模型組損傷程度減輕，古日古木單、復(fù)方促進(jìn)了模型組恢復(fù)，使小葉結(jié)構(gòu)清晰，損傷后72h各組均恢復(fù)至近正常細(xì)胞結(jié)構(gòu)狀態(tài)，整體來看，單復(fù)方均有保護(hù)作用；3.古日古木復(fù)方劑量組和單方中、低劑量組均能明顯減少CCl4引起的肝細(xì)胞凋亡（P<0.05），作用與古日古木復(fù)方劑量有呈正相關(guān)的趨勢，與古日古木單方劑量有呈負(fù)相關(guān)的趨勢；4.古日古木復(fù)方各組均能明顯降低Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2Associated

7、 X Protein,Bax)表達(dá)量（P<0.05），其中高、低劑量組還能顯著提高和Bcl-2/Bax表達(dá)量（P<0.05），高劑量組也能使Bcl-2表達(dá)量明顯增高（P<0.05），古日古木單方中、低劑量組能夠明顯增加B細(xì)胞淋巴瘤基因-2（B cell lymphoma2，Bcl-2）表達(dá)量（P<0.05），其中低劑量組還能夠明顯使Bcl-2/Bax表達(dá)量提高（P<0.05），古日古木單、復(fù)方組均能夠不同程度地降低模型組中含半胱氨酸的天