果蠅中兩個(gè)基因Dxl6和Dnop5啟動(dòng)子序列的分析.pdf

1、前體mRNA選擇性剪接發(fā)生頻率很高，它在人類基因組中廣泛存在，是增加蛋白質(zhì)多樣性及基因表達(dá)復(fù)雜程度的主要原因。近來(lái)研究顯示，一些富含絲氨酸和精氨酸蛋白(SR蛋白)對(duì)于剪接的順利完成有著至關(guān)重要的作用。SR蛋白是具有幫助識(shí)別正確剪接位點(diǎn)并促進(jìn)剪接體成熟的一類重要的剪接因子，為組成性剪接所必需，在選擇性剪接中更起著不可替代的作用。 Dxl6基因是2000年克隆的一種編碼新基因。根據(jù)其氨基酸序列特點(diǎn)分析，它可能為SR蛋白家族的成員，參

2、與剪接過(guò)程。原位雜交顯示，Dxl6基因主要在果蠅后期胚胎的神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)，與神經(jīng)發(fā)育相關(guān)。對(duì)DXl6結(jié)構(gòu)的分析顯示，它由兩個(gè)外顯子和一個(gè)內(nèi)含子組成，其內(nèi)含子編碼Dnop5。Dnop5是nop5/sikl家族中的一員，這一家族成員主要編碼小核糖體蛋白復(fù)合物，主要在rRNA加工中起重要作用。K00230和K00213是兩株P(guān)因子插入的突變體果蠅，P因子插入位點(diǎn)定位于Dxl6的內(nèi)含子區(qū)域。這兩株果蠅的表型非常相似，均在三齡幼蟲(chóng)或蛹期致死，少數(shù)逃

3、逸者有背部剛毛、翅膀、腿、眼睛發(fā)育的異常。Northern和western結(jié)果顯示：這兩株突變的果蠅中DX16和DNop5的表達(dá)均明顯下降。因此DXl6和DNop5對(duì)于果蠅的正常生長(zhǎng)發(fā)育是至關(guān)重要的。我們希望通過(guò)分析Dxl6和Dnop5的啟動(dòng)子序列，了解這兩個(gè)基因的表達(dá)調(diào)控方式。 首先，通過(guò)報(bào)告基因熒光素酶系統(tǒng)和果蠅S2細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，分析了Dxl6和Dnop5的啟動(dòng)子序列，明確它們具有不同的基本啟動(dòng)序列。 其次，通過(guò)增