三乙烯四胺與G-四鏈體DNA相互作用、抑制端粒酶活性及抗腫瘤作用研究.pdf

1、本課題在對G4-DNA及現(xiàn)有以G4-DNA為靶點(diǎn)的小分子化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析的基礎(chǔ)上,大膽推測三乙烯四胺(Triethylene tetramine,TETA)能夠與G4-DNA產(chǎn)生相互作用提高其穩(wěn)定性.因此,本文以三乙烯四胺為研究對象,探討了該化合物對G4-DNA穩(wěn)定性、端粒酶活性及細(xì)胞增殖的影響,旨在開發(fā)一種以G-四鏈體DNA為靶點(diǎn)的新型小分子端粒酶抑制劑.圓二色譜(Circular Dischroism,CD)是測定多核苷酸結(jié)構(gòu)變

2、化最靈敏的方法之一,也是研究寡核苷酸多態(tài)結(jié)構(gòu)的一種重要手段.寡核苷酸形成G4-DNA結(jié)構(gòu)以后,其CD譜圖具有明顯的特征.隨后,我們用改進(jìn)的TRAP(Telomeric repeat amplification protocol)-銀染法考察了TETA對端粒酶活性的影響.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,TETA不僅能在體外抑制端粒酶活性(抑制50﹪端粒酶活性的有效濃度,即IC<,50><'tel>值為7.8 μM);并且能夠抑制HeLa細(xì)胞內(nèi)的端粒酶活性.

3、為了區(qū)別TETA對端粒酶即Taq聚合酶的抑制作用,我們進(jìn)行了Taq聚合酶活性檢測,當(dāng)TETA的濃度達(dá)到100μM時,仍然對Taq聚合酶活性沒有顯著影響.腫瘤細(xì)胞的主要特點(diǎn)是惡性增殖,抑制腫瘤細(xì)胞的增殖是篩選抗腫-瘤藥物的重要指標(biāo).本文研究結(jié)果證實(shí),TETA能夠抑制端粒酶陽性的HeLa、MCF-7、K562、ECV-304及PC12細(xì)胞的增殖.上述研究結(jié)果表明,TETA能穩(wěn)定G4-DNA結(jié)構(gòu)并抑制端粒酶活性,進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞增殖,是一種具