體外培養(yǎng)大鼠胚胎神經(jīng)干細胞的研究.pdf

1、用細胞培養(yǎng)技術(shù)在DMEM/F12無血清培養(yǎng)液中培養(yǎng)大鼠胚胎神經(jīng)干細胞,觀察了不同因素對體外培養(yǎng)神經(jīng)干細胞的影響.結(jié)果如下:在DMEM/F12為基礎(chǔ)的無血清培養(yǎng)液中神經(jīng)干細胞能夠懸浮或貼壁生長,并且傳代細胞的生長速度比原代細胞快;在有限稀釋法克隆神經(jīng)干細胞時,培養(yǎng)液全更換處理組所形成的神經(jīng)干細胞克隆數(shù)少于培養(yǎng)液更換一半處理組,軟瓊脂法干細胞克隆時,所形成的干細胞克隆數(shù)多于更換全部培養(yǎng)液處理組、但少于更換一半培養(yǎng)液處理組;接種密度在1×10

2、<'4>個細胞/ml以上的培養(yǎng)液中形成的干細胞克隆數(shù)多于1×10<'3>個細胞/ml的培養(yǎng)液,接種密度為1×10<'2>個細胞/ml的培養(yǎng)液中沒有形成干細胞克隆;在培養(yǎng)液中分別或同時添加bFGF和EGF,均能夠有效的使大鼠胚胎神經(jīng)干細胞生長增殖促進作用,濃度為20ng/ml的效應(yīng)最好,分別添加bFGF和EGF時,bFGF的效果優(yōu)于EGF;添加脂類物質(zhì)會使神經(jīng)干細胞的生長速度加快2.5倍;對其神經(jīng)干細胞進行核型分析的結(jié)果表明,在體外條件下