人胎腦神經(jīng)干細(xì)胞的體外分離、培養(yǎng)與鑒定.pdf

1、背景與目的:中樞神經(jīng)系統(tǒng)的許多疾病,如腦和脊髓的損傷、腦出血、腦缺血性卒中、帕金森病、老年性癡呆病等都存在不同程度和方式的神經(jīng)細(xì)胞缺失或變性死亡,并由此引起神經(jīng)功能的損害。這些疾病所致的神經(jīng)功能損害采用目前傳統(tǒng)的治療效果多不顯著,神經(jīng)干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)與移植研究進(jìn)展為其治療帶來(lái)了新的思路和方法。
　　本實(shí)驗(yàn)旨在探索人胎腦神經(jīng)干細(xì)胞的體外分離培養(yǎng)條件,從而在體外大量增殖神經(jīng)干細(xì)胞;并觀察神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化的特點(diǎn)。
　　方法:采用包

2、含堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGF)的無(wú)血清培養(yǎng)技術(shù),從8-16周自愿水囊引產(chǎn)人胎腦皮質(zhì)中分離出神經(jīng)干細(xì)胞,并進(jìn)行培養(yǎng)、傳代、分化觀察,應(yīng)用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞及其分化的細(xì)胞進(jìn)行鑒定。
　　結(jié)果:從8-16周人胎腦皮質(zhì)中成功分離出具有自我更新和多分化潛能的神經(jīng)干細(xì)胞,在無(wú)血清培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),形成神經(jīng)球,該細(xì)胞具有連續(xù)增殖能力,可傳代培養(yǎng),表達(dá)神經(jīng)巢蛋白抗原(Nestin);在含血清