有機(jī)相中脂肪酶催化合成辣椒素酯的研究.pdf

1、辣椒素酯(Capsiate)類物質(zhì)，始稱類辣椒素類物質(zhì)(Capsaicinoid-like Substances CLSs)，是二十世紀(jì)八十年代末從日本的一種甜椒品種中分離得到的一種結(jié)構(gòu)類似辣椒素的酯類物質(zhì)，即為相對應(yīng)的辣椒素分子中的-NH-基團(tuán)被-O-所替代，其生物活性與辣椒素類似。 隨著非水酶學(xué)的發(fā)展，有機(jī)相中生物催化合成天然產(chǎn)物的研究正在興起，其中脂肪酶的非水相催化研究最為廣泛。 本文對利用生物合成方法將辣椒素

2、轉(zhuǎn)化為無辛辣味的辣椒素酯進(jìn)行了研究，建立了辣椒素酯的實(shí)驗(yàn)室制備方法，并對合成壬酸香草醇酯的酶促反應(yīng)建立了動(dòng)力學(xué)模型，結(jié)果如下： 第一，本文考察了與天然辣椒素酯結(jié)構(gòu)最接近的壬酸香草醇酯在有機(jī)相中用脂肪酶催化合成的方法。結(jié)果表明脂肪酶Novozym 435的活性最好，最適條件為：在1 mL脫水丙酮中，香草醇與壬酸甲酯的濃度分別為50 mmol/L、75 mmol/L，酶量為20 mg，30℃下反應(yīng)10 h，產(chǎn)率可達(dá)到65.9％。所

3、得產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化后以UV、IR、1HNMR、13CNMR及MS表征了結(jié)構(gòu)。 第二，在上述條件下，以天然辣椒素為原料經(jīng)甲醇醇解后所得混合辣椒素脂肪酸甲酯，再與香草醇在脂肪酶催化下實(shí)現(xiàn)了天然辣椒素酯類物質(zhì)的酶法合成。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，經(jīng)HPLC檢測不含辣椒素類物質(zhì)，其結(jié)構(gòu)以GC-MS進(jìn)行了表征。 第三，進(jìn)行了菌種培養(yǎng)及發(fā)酵產(chǎn)酶條件、酶的固定化及催化轉(zhuǎn)化方法的研究。以假絲酵母菌發(fā)酵所得的粗脂肪酶固定化，初步研究了