基于工具酶擴增和納米金比色構(gòu)建DNA信號放大新方法的研究.pdf

1、DNA在生物傳感器和功能納米材料的構(gòu)建中有著廣泛的應用。DNA信號放大常用于構(gòu)建高靈敏性的分析技術(shù)，尤其應用于痕量分析物的檢測。具有特殊性質(zhì)或結(jié)構(gòu)的金屬納米材料也經(jīng)常與DNA聯(lián)用，進行新型傳感器的設計或功能化納米材料的開發(fā)，例如，具有特殊光學性質(zhì)的納米金就已廣泛應用于生物傳感器的設計。
　　DNA技術(shù)由于可以實現(xiàn)多種形式的信號放大而在分析化學領域發(fā)揮著重要的作用。傳統(tǒng)的DNA信號放大的方式，如聚合酶鏈式反應(Polymerase

2、Chain Reaction，PCR)，依賴于熱變性、工具酶和必要的儀器才能實現(xiàn)對目標的擴增，很難滿足于發(fā)展快速、簡便、易操作、便于觀察的分析技術(shù)。因此，研究新型、恒溫以及無酶參與的DNA信號放大方法具有非常重要的意義。本論文中，我們基于工具酶擴增和納米金比色構(gòu)建了兩種DNA信號放大的新方法。
　　一，我們將聚合酶和切刻酶聯(lián)用，設計了一種核酸恒溫擴增的新方法并用于miRNA的檢測。在目標miRNA的含量為10-16-10-13mo

3、l范圍內(nèi)，檢測結(jié)果具有良好的線性;通過對不同堿基序列的miRNA進行檢測，驗證了這種方法具有良好的特異性;通過對血清中樣品的檢測，檢驗了這種方法的實用性。
　　二，我們將DNA修飾的納米金與雜交鏈式反應（Hybridization Chain Reaction，HCR）相結(jié)合，構(gòu)建了一種無酶參與的DNA信號放大的新型比色方法。這種方法簡單，靈敏度高，不需要酶參與，利用這種方法進行目標的比色分析，僅用肉眼就可以檢測到0.5nM的目標