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文檔簡介
1、糞臭素即3-甲基吲哚,有極強(qiáng)的糞臭味,是人和動物體內(nèi)色氨酸的代謝產(chǎn)物,人攝取的很多食物中(如多種肉類等)本身也含有糞臭素。糞臭素對人、動物及環(huán)境均有一定的危害作用,含有糞臭素或可以轉(zhuǎn)變?yōu)榧S臭素的外源性食物進(jìn)入體內(nèi)后,糞臭素將不可避免地與動物和人體內(nèi)的消化酶發(fā)生作用,人和動物通過皮膚吸收的來自外界環(huán)境中的糞臭素也有可能與體內(nèi)的消化酶發(fā)生作用,因此我們研究了糞臭素對幾種重要消化酶部分性質(zhì)的影響。我們選擇了在消化淀粉和糖類物質(zhì)中起重要作用的α
2、-淀粉酶以及在蛋白質(zhì)消化過程中起主要作用的胃蛋白酶和胰蛋白酶。本文首先研究了糞臭素對α-淀粉酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶活性的影響,接著通過紫外光譜法和熒光光譜法進(jìn)一步研究了糞臭素對這三種重要消化酶結(jié)構(gòu)的影響。 研究發(fā)現(xiàn)糞臭素對三種消化酶均有一定程度的抑制作用,其對胰蛋白酶的抑制率最高,對胃蛋白酶的抑制率最低。當(dāng)糞臭素與酶的終濃度比為5/1時,糞臭素對這三種酶的抑制率分別達(dá)到32.4%、28.7%及26.6%。 當(dāng)向三種消
3、化酶中加入不同濃度的糞臭素時,隨著糞臭素濃度的增加,α-淀粉酶在265 nm附近、胃蛋白酶在275 nm附近及胰蛋白酶在270 nm附近的紫外吸收峰均有一定程度的升高。 通過實(shí)驗(yàn)我們得知糞臭素對三種消化酶的內(nèi)源熒光均有很強(qiáng)的猝滅作用,根據(jù)Stem-Volmer方程作糞臭素對三種消化酶猝滅的F<,0>/F~[Q]曲線,可得出糞臭素對α-淀粉酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶的的表觀猝滅常數(shù)Kq分別為2.42×10<'12>L/mol·s、1
4、.93×10<'12> L/mol·s及2.72×10<'12> L/mol·s,遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于各種猝滅劑對生物大分子的最大擴(kuò)散碰撞常數(shù)2.0×10<'10> L/mol·s,表明糞臭素對三種酶的熒光猝滅并不是由于分子擴(kuò)散和動態(tài)碰撞引起的,很可能是由于有機(jī)小分子糞臭素“鑲嵌”于酶分子之間,彼此結(jié)合形成了某種特定結(jié)構(gòu)的締合物而引起的靜態(tài)猝滅。以lg[(F<,0>-F)/F]對lg[Q]作線性擬合,即可求出糞臭素與三種酶的結(jié)合常數(shù)K和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n
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