Bt工程菌HD8Ea2的構建及Cry8Ea2蛋白對華北大黑鰓金龜中腸微生物的影響.pdf_第1頁
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1、華北大黑鰓金龜(Holotrichiaoblita)屬于鞘翅目金龜甲總科(Scarabaeoidae),其幼蟲對農、林、牧草等都有為害,在我分布廣泛,種群數量大,危害嚴重。
　　 蘇云金桿菌(Bacillusthuringiensis,簡稱Bt)是革蘭氏陽性細菌(G+),在其生活史中能產生多種殺蟲晶體蛋白,是目前應用最為廣泛而有效的一種生物殺蟲劑。本研究從全國各地的土樣中篩選得到含cry8類基因的野生型菌株GW11,該菌株對華北

2、大黑鰓金龜具有殺蟲活性,LC50為6.43×106cell/mL。Cry8Ea2蛋白是一種新型蘇云金桿菌殺蟲晶體蛋白。本研究通過穿梭載體pSXY422b將cry8Ea2導入Bt無晶體突變菌株HD73-(cry-)中,獲得工程菌HD8Ea2。Cry8Ea2蛋白在工程菌中獲得表達。通過分子篩層析,成功獲得純化的130kDa活性毒蛋白。用改進的生物活性測定方法進行Cry8Ea2蛋白對華北大黑鰓金龜一齡幼蟲的殺蟲活性測定,LC50為0.2679

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