對(duì)鞘翅目害蟲有活性Bt菌株的篩選及cry8Ea2基因的克隆、表達(dá)和活性研究.pdf

1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文對(duì)鞘翅目害蟲有活性Bt菌株的篩選及cry8Ea2基因的克隆、表達(dá)和活性研究姓名：劉興龍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治指導(dǎo)教師：李國(guó)勛李長(zhǎng)友200806075將cry8Ea2基因插入到大腸桿菌表達(dá)載體pET21b()中，構(gòu)建了T7啟動(dòng)子控制的大腸桿菌重組表達(dá)質(zhì)粒pET21bcry8Ea，再將重組表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)，SDSPAGE分析表明該基因在大腸桿菌BL21(DE3

2、)中能夠正常表達(dá)130kD的蛋白。6Cry8Ea2表達(dá)產(chǎn)物殺蟲活性測(cè)定結(jié)果表明，該蛋白對(duì)暗黑鰓金龜、琉璃弧麗金龜和柳藍(lán)葉甲等幼蟲具有殺蟲活性，在濃度為898)tg／g土?xí)r對(duì)暗黑鰓金龜、琉璃弧麗金龜一齡幼蟲14天的校正死亡率分別為4667％、5556％；在濃度為898／ag／mL時(shí)對(duì)柳藍(lán)葉甲三齡幼蟲96小時(shí)的校正死亡率為3333％。而對(duì)華北大黑鰓金龜、茄二十八星瓢蟲、黃粉蟲、棉鈴蟲、甜菜夜蛾、粘蟲、粉紋夜蛾等幼蟲均未發(fā)現(xiàn)有活性。關(guān)鍵詞：B