柄海鞘（Styela clava）活性物質(zhì)的結(jié)構(gòu)解析及生物活性研究.pdf

1、該文從以下幾個(gè)方面對(duì)柄海鞘生理活性物質(zhì)進(jìn)行了初步的研究.首先,將柄海鞘的鞘體和鞘囊進(jìn)行精細(xì)剝離,避免了物質(zhì)的相互干擾,更好的進(jìn)行物質(zhì)的定位.實(shí)驗(yàn)中,我們單獨(dú)對(duì)柄海鞘鞘體中的化學(xué)成分進(jìn)行研究.按照目前比較常用的天然產(chǎn)物提取分離方法,將樣品冷凍干燥后,用甲醇:甲苯(3:1)浸泡,收集濾液,減壓蒸餾得到的濃縮液用NaNO<,3>水溶液萃取,收集水相,減壓濃縮至NaNO<,3>晶體析出.用氯仿反復(fù)浸泡NaNO<,3>晶體,收集氯仿浸提液,減壓濃

2、縮,得紅棕色浸膏狀鞘體粗提物.采用硅膠濕柱層析,用氯仿作展開劑和洗脫液,反復(fù)硅膠層析,對(duì)柄海鞘鞘體粗提物進(jìn)行分離、提取與純化,利用高效液相色譜檢測(cè),得到混合組分F Ⅰ.其次,采用氣相-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)技術(shù),對(duì)FⅠ進(jìn)行成分分析和結(jié)構(gòu)解析,結(jié)果表明FⅠ的主成分為化合物1.2-雙(5-甲基-2-苯并惡唑)-乙烯.最后,利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)對(duì)FⅠ進(jìn)行抗腫瘤活性和免疫調(diào)節(jié)活性的研究.我們研究了FⅠ對(duì)癌細(xì)胞活性的影響,通過MTT法初步檢驗(yàn)了其對(duì)癌

3、細(xì)胞活性的抑制作用.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)于BEL-7402肝癌細(xì)胞,FⅠ在不同作用時(shí)間和不同濃度對(duì)其活性均有不同程度的抑制作用,作用時(shí)間為48h,濃度為60μg/ml時(shí)作用最為顯著.但是對(duì)于BGC-823胃癌細(xì)胞,FⅠ僅在60μg/ml濃度下對(duì)其活性有抑制作用.對(duì)正常小鼠脾臟細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),研究FⅠ的免疫調(diào)節(jié)活性,實(shí)驗(yàn)表明,FⅠ對(duì)淋巴細(xì)胞增殖和培養(yǎng)細(xì)胞上清液中IL2、IL-6的活性均無(wú)顯著影響.相信,通過進(jìn)一步的研究,必然會(huì)推進(jìn)中國(guó)在此領(lǐng)