PPA基因轉(zhuǎn)化旱稻的研究.pdf

1、水稻是世界主要的糧食作物。旱稻，也稱陸稻，是相對于水稻而言的一種稻谷，是一種抗旱力強、耐貧瘠、適于旱地直播旱管的栽培稻類型。本課題以早稻成熟種子為外植體，擬利用掌葉半夏凝集素(Pinellia pedatisecta agglutinin，PPA)基因轉(zhuǎn)化，建立較成熟的早稻栽培品種抗蚜蟲基因的轉(zhuǎn)化體系。
　　 本文選用了“鯤旱1號”，從種子表面消毒時間、不同培養(yǎng)基成分、不同激素濃度對愈傷誘導(dǎo)的影響，到侵染、篩選等各方面進行了研究

2、，將抗蟲基因(PPA基因)和bar抗性基因通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法導(dǎo)入早稻愈傷組織，在含除草劑的選擇培養(yǎng)基上進行篩選，然后分化并壯苗，獲得了抗性植株。
　　 實驗結(jié)果表明，最適的消毒劑是次氯酸鈉，NB培養(yǎng)基中添加2 mg·L-1的2，4-D是愈傷誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基。轉(zhuǎn)化前5天進行愈傷組織繼代培養(yǎng)有利于提高轉(zhuǎn)化率，當(dāng)農(nóng)桿菌濃度在0.2-0.3之間時，轉(zhuǎn)化效果最好。將已轉(zhuǎn)化的愈傷組織在含2 mg·L-1的2，4-D的恢復(fù)培養(yǎng)基上恢復(fù)培養(yǎng)5天至