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
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
通過(guò)研究早期不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的孕婦絨毛組織Tim-3的表達(dá)情況以及血清可溶型Tim-3(sTim-3)的水平,探討Tim-3與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)性。
方法:
1.病例資料
選取2016年2-8月在山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院就診的早期不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者,此次證實(shí)為難免流產(chǎn)、不全流產(chǎn)或稽留流產(chǎn),共23例作為實(shí)驗(yàn)組,平均年齡31±4歲。入組標(biāo)準(zhǔn):自然流產(chǎn)次數(shù)≥2次,孕周≤10周;排除標(biāo)準(zhǔn):夫婦染色
2、體異常;婦科B超、宮腔鏡等提示生殖器官畸形;甲功、性激素六項(xiàng)、糖耐量試驗(yàn)等內(nèi)分泌指標(biāo)異常;病毒等感染性疾??;抗磷脂抗體等自身抗體陽(yáng)性;孕早期用藥、放射性、化學(xué)毒物等接觸史;丈夫精液異常。選取同期正常妊娠自愿終止的早孕者20例(既往至少生育一次,無(wú)不良妊娠史,此次無(wú)流產(chǎn)跡象)為對(duì)照組,平均年齡29±5歲。
2.實(shí)驗(yàn)方法
收集正常妊娠組和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)組絨毛組織后,立即用生理鹽水沖洗,去掉殘存血液及蛻膜組織,用10%福爾馬林
3、固定,常規(guī)石蠟包埋后制成5μm厚切片。采用免疫組織化學(xué)法及軟件分析Tim-3在兩組絨毛組織中的平均灰度值及陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率,確定Tim-3在絨毛組織中的表達(dá)情況;
收集兩組孕婦外周血,并置于含促凝劑的黃色管中,37℃放置30分鐘后離心,留取上清,置于-80℃冰箱中冷凍保存,使用時(shí)統(tǒng)一解凍。采用ELISA法測(cè)定sTim-3在兩組血清中的表達(dá)水平。
3.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用軟件SPSS20.0對(duì)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)量資
4、料均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,樣本均數(shù)采用兩樣本t檢驗(yàn)。α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
結(jié)果:
1.Tim-3主要表達(dá)于絨毛組織的滋養(yǎng)層細(xì)胞,絨毛間質(zhì)基本不表達(dá)。每張切片隨機(jī)選取5個(gè)視野,測(cè)量其灰度值及陽(yáng)性細(xì)胞百分率,再計(jì)算出每組絨毛組織中Tim-3的平均表達(dá)情況。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)組Tim-3表達(dá)的平均灰度值為179.79±9.37,平均陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率為89.88±12.29,表達(dá)強(qiáng)度明顯高于正常妊娠組(平均灰度值為192.10±1
5、1.78,平均陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率為63.60±31.88),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.復(fù)發(fā)性流產(chǎn)組血清中sTim-3的水平為138.64±39.66 pg/ml,正常妊娠組為101.32±29.94pg/ml,前者明顯高于后者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
Tim-3與sTim-3可能與早期胚胎發(fā)育的調(diào)節(jié)過(guò)程有關(guān),與早期不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生有一定的相關(guān)性。該研究為早期URSA的發(fā)
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