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1、大氣臭氧的損耗導(dǎo)致了地球表面具有生物學(xué)效應(yīng)的紫外線-B(UV-B)輻射增強(qiáng)。紫外線-B(UV-B)輻射能夠影響植物體內(nèi)次生代謝過程,提高次生代謝產(chǎn)物含量。藥用植物中有效成分主要是次生代謝產(chǎn)物,然而,藥用植物中有效成分含量大多不高,這在一定程度上限制了藥用植物作為藥材的開發(fā)利用。本論文以藥用菊花為供試材料,系統(tǒng)研究了UV-B輻射對(duì)采后菊花花序的生理特性、活性成分和差異蛋白質(zhì)組的影響,并且,優(yōu)化了利用超聲提取法和分光光度法測(cè)定藥用菊花花序中
2、的綠原酸含量。
本研究主要內(nèi)容包括:⑴采用單因素方差分析和二因素試驗(yàn)優(yōu)化了超聲提取法和分光光度法測(cè)定藥用菊花花序中綠原酸的含量,結(jié)果表明最優(yōu)條件為:用80%甲醇作提取劑,超聲提取30min,加0.02 mol/L三氯化鐵0.5mL進(jìn)行顯色反應(yīng),靜置30min后,于可見分光光度計(jì)755nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值。該方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、靈敏、重復(fù)性強(qiáng),可用于菊花中綠原酸的提取和測(cè)定。⑵UV-B輻射對(duì)采后菊花花序中生理特性、有效成分、營(yíng)養(yǎng)成分
3、及次生代謝酶的影響與輻射強(qiáng)度相關(guān)。本試驗(yàn)中所設(shè)定的UV-B輻射強(qiáng)度分別為:0μW cm-2(UV0)、50μW cm-2(UV50)、200μW cm-2(UV200)、400μW cm-2(UV400)、600μW cm-2(UV600)和800μW cm-2(UV800)。UV-B處理顯著的提高了菊花花序中過氧化氫(UV50除外),但對(duì)丙二醛含量沒有顯著的影響。UV600和 UV800顯著的提高了菊花花序中葉綠素b和總?cè)~綠素的含量。
4、UV400和UV600顯著的提高了花序中花色素苷、類胡蘿卜素、紫外吸收物質(zhì)的含量和苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸羧化酶的活性。UV-B輻射強(qiáng)度和苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸羧化酶和對(duì)香豆酸輔酶 A連接酶活性之間呈二階函數(shù)關(guān)系,R2值分別為0.8361、0.5437和0.8025。UV-B處理顯著的提高了總維生素 C、綠原酸和黃酮(UV800除外)含量。結(jié)果表明,UV-B輻射能夠促進(jìn)采后菊花花序中的次生代謝過程,提高花序中有效成分含量。在本試驗(yàn)條件下,
5、最佳的UV-B輻射強(qiáng)度為200-600μWcm-2。⑶UV-B輻射對(duì)菊花花序中生理特性、有效成分、營(yíng)養(yǎng)成分和次生代謝酶活性的影響也受到輻射時(shí)間的影響。本試驗(yàn)中所設(shè)定的UV-B輻射時(shí)間分別為:0、15、30、60、120、180min。結(jié)果表明,較短時(shí)間UV-B輻射(15min)顯著的提高了菊花花序中過氧化氫含量,而較長(zhǎng)時(shí)間的的UV-B輻射(180min)卻顯著的降低了花序中過氧化氫含量?;ㄐ蛑斜⒆贤馕瘴镔|(zhì)、葉綠素a含量沒有受到U
6、V-B輻射時(shí)間顯著影響。當(dāng)輻射時(shí)間為15、30、60和120min時(shí),UV-B輻射顯著的提高了菊花花序中綠原酸和黃酮(除15min)含量。次生代謝過程中的關(guān)鍵酶苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸羥化酶和對(duì)香豆酸輔酶 A連接酶與 UV-B輻射時(shí)間呈二階多項(xiàng)式的關(guān)系,R2值分別為0.7883、0.5742和0.5628。結(jié)果表明,本試驗(yàn)條件下,UV-B輻射時(shí)間為30-120min最有利于菊花品質(zhì)提高。⑷用2D-E技術(shù)對(duì)輻射前后差異蛋白質(zhì)組進(jìn)行研究,得到
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