RTE彈性定量參數(shù)與免疫性肝纖維化ColⅠ、ColⅢ及NLRP3的相關(guān)性分析.pdf

1、目的：
　　本課題通過研究實(shí)時(shí)組織彈性定量參數(shù)與免疫性肝纖維化肝組織的Ⅰ型膠原纖維（ColⅠ）、Ⅲ型膠原纖維（ColⅢ）及NLRP3（NOD-like receptor protein3）炎癥因子之間的相關(guān)性，從分子水平探討彈性成像定量參數(shù)評(píng)價(jià)肝纖維化分期及炎癥活動(dòng)的可行性。
　　方法：
　　共60只Sprague-Dawley(SD)大鼠，隨機(jī)選取52只作為實(shí)驗(yàn)組（免疫性肝纖維化模型），8只作為對(duì)照組。免疫性肝纖維化

2、模型造模方法：尾靜脈注射豬血清，每周2次，每次0.5ml，共14周，對(duì)照組注射等劑量生理鹽水。自造模第二周起，每兩周從實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組分別隨機(jī)取6只和1只大鼠進(jìn)行實(shí)時(shí)組織彈性成像（RTE）檢查，取得12個(gè)彈性定量參數(shù)，包括肝纖維化指數(shù)（LF Index）、應(yīng)變均值（MEAN）、藍(lán)色區(qū)域百分比（％AREA）、標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）、復(fù)雜度（COMP）、峰度（KURT）、偏度（SKEW）、對(duì)比度（CONT）、均等性（ENT）、雜亂度（IDM）、一致

3、性（ASM）及相關(guān)性（CORR）。處死大鼠，取肝右葉組織進(jìn)行病理檢查及應(yīng)用
　　western-blot技術(shù)定量檢測(cè)，取材部位盡量與彈性成像切面的感興趣區(qū)（region of interest，ROI）一致，確定肝纖維化分期（S0-S4）及炎癥分級(jí)（G0-G4），應(yīng)用western-blot技術(shù)定量檢測(cè)ColⅠ、ColⅢ及NLRP3炎癥因子的表達(dá)水平，將此三種分子生物學(xué)指標(biāo)與彈性定量參數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：
　

4、　1.大鼠肝組織病理檢查結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組11只大鼠因免疫刺激過重或自身免疫反應(yīng)敏感而導(dǎo)致死亡。余41只大鼠的肝纖維化分期：7只處于 S0期，6只處于 S1期，10只處于S2期，10只處于S3期，8只處于S4期；肝組織炎癥分級(jí)：6只處于G0級(jí)，11只處于G1級(jí)，10只處于G2級(jí)，10只處于G3級(jí)，4只處于G4級(jí)。大鼠肝組織纖維化分期與炎癥分級(jí)具有顯著的相關(guān)性（r=0.844，P＜0.05）。
　　2. ColⅠ（r=0.728，P＜0.

5、05）及ColⅢ（r=0.692，P＜0.05）的表達(dá)水平均與肝纖維化分期具有相關(guān)性，提示ColⅠ、ColⅢ表達(dá)水平均可反映肝組織病理纖維化程度。
　　3. NLRP3炎癥因子的表達(dá)水平與肝炎癥分級(jí)具有相關(guān)性（r=0.748，P＜0.05），提示NLRP3炎癥因子表達(dá)水平可以反映肝組織炎癥活動(dòng)壞死程度。
　　4. RTE彈性定量參數(shù)與ColⅠ及ColⅢ的表達(dá)水平具有相關(guān)性。在12個(gè)彈性成像參數(shù)中，LF Index、MEAN、

6、%AREA、SKEW、ENT、IDM、ASM及 CORR與ColⅠ表達(dá)水平具有相關(guān)性，其中LF Index相關(guān)性最強(qiáng)（r=0.694，P＜0.05）， MEAN次之（r=-0.643，P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；LF Index、MEAN、SD、ENT及ASM與ColⅢ表達(dá)水平具有相關(guān)性，其中LF Index相關(guān)性最強(qiáng)（r=0.614， P＜0.05），MEAN次之（r=-0.556，P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　

7、5. RTE彈性定量參數(shù)與NLRP3炎癥因子的表達(dá)水平具有相關(guān)性。在12個(gè)彈性成像參數(shù)中，LF Index、MEAN、SD、%AREA、COMP、SKEW、ENT、IDM及ASM與NLRP3炎癥因子表達(dá)水平具有相關(guān)性，其中LF Index相關(guān)性最強(qiáng)（r=0.713， P＜0.05），%AREA次之（r=0.672，P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　RTE彈性定量參數(shù)與ColⅠ、ColⅢ及NLRP3炎癥因子表