高糖H9c2運用七氟醚后處理時HIF-1α對mPTP通道調(diào)節(jié)機制的研究.pdf

1、目的：探討高糖狀態(tài)心肌細胞低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）對線粒體膜通透性轉(zhuǎn)化孔（mPTP）的調(diào)節(jié)機制，并揭示高糖狀態(tài)下心肌缺血再灌注損傷加重的關(guān)鍵分子靶點。
　　方法：運用H9c2心肌細胞系建立缺氧復(fù)氧損傷模型，采用試劑盒檢測乳酸脫氫酶（LDH）及CCK-8水平；TUNEL法檢測細胞凋亡；通過激光共聚焦檢測細胞線粒體膜通透性轉(zhuǎn)化孔及線粒體膜電位改變；通過Western blot法檢測HIF-1α及己糖激酶（HKII）的表達；免疫

2、熒光法檢測HKII含量及其分布。
　　結(jié)果：
　　1）與正常組相比較，缺氧復(fù)氧損傷及七氟醚后處理均可上調(diào)HIF-1α蛋白表達，其中七氟醚上調(diào)更為顯著，HIF-1α可抑制mPTP開放，減少細胞凋亡；
　　2）抑制HIF-1α其下游靶基因HKII表達受到明顯抑制，mPTP通道開放增加，細胞損傷明顯；
　　3）抑制HKII后，HIF-1α喪失對mPTP的調(diào)節(jié)，七氟醚后處理失去其心肌保護作用；
　　4）在高糖狀態(tài)下

3、，運用七氟醚后處理，并未減少心肌細胞凋亡。其HIF-1α及HKII的表達較正常七氟醚處理組無明顯差異，但HKII存在向細胞膜聚集現(xiàn)象。
　　結(jié)論：在缺氧復(fù)氧損傷中七氟醚后處理可上調(diào)HIF-1α蛋白表達，產(chǎn)生心肌保護作用。其機制可能是上調(diào)HIF-1α能夠激活其下游靶基因HKII，抑制mPTP通道的開放，從而減輕缺氧復(fù)氧造成的心肌細胞損傷。高糖狀態(tài)下七氟醚保護作用減弱或消失的原因可能是由于HKII發(fā)生轉(zhuǎn)位導(dǎo)致HIF-1α失去了對mPT