七氟醚后處理對糖尿病大鼠心肌保護失效的機制與Drp1活性的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　干預(yù)動力相關(guān)蛋白-1（dynamin related protein-1, Drp1）的活性，探究糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷（myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI）模型不可逆損傷程度之差別；探求七氟醚后處理對糖尿病大鼠心肌保護失效的機制是否與Drp1的活性有關(guān)。
　　方法：
　　健康成年雄性SD大鼠，凈重為225~275 g，以高碳水化合物-高脂肪飼料飼

2、喂并行鏈脲佐菌素30 mg/kg腹腔內(nèi)給藥制備II型糖尿?。═2DM）模型。對大鼠每個星期測定－次空腹血糖，連續(xù)四星期不低于300 mgl/dL者認為模型合格。取T2DM模型大鼠40只，依據(jù)計算機隨機數(shù)劃分為4組（n=10）：①單純穿線組（Sham組）、②缺血/再灌注組（I/R組）、③七氟醚后處理組（SP組）、④Drp1活性抑制劑Mdivi-1+七氟醚后處理組（M-SP組）。采取在體阻斷左前降支（left anterior descen

3、ding, LAD）血流0.5 h，再灌注2 h法建立MIRI模型，Sham組單純穿線而不阻斷LAD血流。缺血前15 min M-SP組靜脈注射Mdivi-11.2 mg/kg，再灌注初期5 min內(nèi)SP組、M-SP組吸入2.5％七氟醚進行后處理。再灌注2 h時采集大鼠右頸內(nèi)靜脈血樣，高速離心后取血清，采用ELISA法檢測并計算血清cTnI濃度；隨后處死各組大鼠并取其心肌組織，采用TTC法測定心肌梗死區(qū)面積（infarct size,

4、IS）和缺血危險區(qū)（area at risk, AAR）面積，采用TUNEL法檢測凋亡并計算細胞凋亡指數(shù)（apoptotic index, AI）；采用western blot法測定心肌組織中活化型caspase-3表達水平。
　　結(jié)果：
　　1.AAR和IS測定結(jié)果：與Sham組比較，其余3組心肌AAR面積增大很顯著（P＜0.01），但3組之間兩兩比較AAR面積不構(gòu)成統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。與Sham組比較，其余3組I

5、S增大（P＜0.01）；與I/R組比較，M-SP組IS減小（P＜0.05），而SP組IS差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；與SP組比較，M-SP組IS減?。≒＜0.05）。
　　2.血清cTnI濃度檢測結(jié)果：與Sham組比較，其余3組血清cTnI濃度升高（P＜0.05）；與I/R組比較，M-SP組血清cTnI濃度降低（P＜0.05），而SP組血清cTnI濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；與SP組比較，M-SP組血清cTnI濃度

6、降低（P＜0.05）。
　　3.TUNEL法檢測結(jié)果：與Sham組比較，其余3組心肌組織AI值升高（P＜0.05）；與I/R組比較，M-SP組心肌組織AI值降低（P＜0.05），而SP組心肌組織AI值差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；與SP組比較，M-SP組心肌組織AI值降低（P＜0.05）。
　　4.western blot法檢測結(jié)果：與Sham組比較，其余3組活化型caspase-3表達上調(diào)（P＜0.05）；與I/R組比