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1、目的:探討七氟醚后處理是否通過調(diào)控缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)來改善線粒體呼吸功能及呼吸酶活性減輕心肌缺血再灌注損傷。
方法:88只SD大鼠(SPF級健康雄性)采用Langendorff離體心臟灌流裝置建立大鼠心肌缺血再灌模型,隨機分為4組(n=22):正常對照組(C)、缺血再灌注組(I/R)、七氟醚后處理組(SpostC)、MSP組【缺血再灌注組(I/R)+HIF-1α阻斷劑(2-Methoxyestradiol,2M
2、E2)+七氟醚后處理組(SpostC):(I/R+2ME2+SpostC)】。C組:持續(xù)灌注Krebs-Henseleit(K-H)液180min;I/R組平衡20min,然后灌注4℃Thomas停跳液,32℃下全心缺血40min后灌注K-H液120min;SpostC組:平衡20min后灌注4℃Thomas停跳液,32℃下全心缺血40min后灌注1.0 MAC七氟醚飽和的K-H液15min,后繼續(xù)灌注正常K-H液105min;MSP組
3、全心缺血40min后灌注含2ME2(2uM)+1.0 MAC七氟醚飽和的K-H液15min后繼續(xù)灌注正常K-H液105min。記錄各組平衡末(T1)及復(fù)灌末(T2)的血流動力學(xué)參數(shù);用漢莎氧電極測定心肌線粒體3態(tài)呼吸(State3)、呼吸控制比(Respiratory Control Ratio,RCR)及煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶(NADHO)、琥珀酸氧化酶(SucO)、細(xì)胞色素C氧化酶(CcO)等酶活性變化;用透射電鏡觀察心肌細(xì)胞超
4、微結(jié)構(gòu)的變化;利用熒光光度法檢測心肌線粒體的活性氧(ROS)產(chǎn)生率;Western blot法檢測HIF-1α蛋白表達水平。
結(jié)果:與缺血再灌注(I/R)組相比, SpostC組的HIF-1α表達明顯上調(diào),心功能指標(biāo)、線粒體3態(tài)呼吸、呼吸控制比(RCR)、細(xì)胞色素C氧化酶(CcO)、NADH氧化酶(NADHO)、琥珀酸氧化酶(SUCO)的活性、線粒體活性氧產(chǎn)生率明顯優(yōu)于I/R組,但這種優(yōu)勢被HIF-1α特異性抑制劑2ME2完全
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