人BRI-,3-編碼蛋白N端與SCG10的相互作用影響細胞微管結構.pdf

1、BRI<,3>基因屬于BRI基因家族的一員,目前得到分離鑒定的該家族成員包括BRI<,1-3>.BRI<,3>屬于Ⅱ型單跨膜蛋白,有一個跨膜區(qū),N端較短,C端較長.生物信息學分析沒有發(fā)現(xiàn)任何的亞細胞定位信號和功能結構域.該實驗室前期工作已經(jīng)完成了BRI<,3>的表達譜分析和表達產物的亞細胞定位分析.更為重要的是在前期工作中,以hBRI<,3>蛋白的N端作為誘餌蛋白,利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選人胎腦cDNA文庫,發(fā)現(xiàn)SCG10蛋白與BRI<,

2、3>蛋白的N端發(fā)生相互作用.在上述工作的基礎上,我們深入研究了BRI<,3>與SCG10相互作用的生物學效應.SCG10蛋白作為stathmin蛋白家族的一個成員,具有抑制微管組裝,促進微管去組裝的功能.因此我們首先研究了BRI<,3>蛋白和SCG10蛋白對細胞微管結構的影響.體外實驗結果表明,BRI<,3>蛋白對SCG10蛋白引起的抑制微管組裝的過程沒有明顯影響;而對于其促進微管去組裝、導致微管解聚的過程具有明顯的抑制作用.體內實驗研

3、究結果表明,BRI<,3>蛋白在PC12細胞中的過表達能夠顯著的抑制由SCG10蛋白過表達造成的細胞微管網(wǎng)絡的解體.因此,我們認為BRI<,3>蛋白是一種在神經(jīng)元細胞中具有微管穩(wěn)定作用的蛋白,其通過與SCG10或其它蛋白的相互作用,來調節(jié)神經(jīng)元細胞的微管骨架結構.此外,作為一個跨膜分子,BRI<,3>(N)端參與調節(jié)細胞微管結構,為研究其是否在細胞內信號傳導過程中發(fā)揮作用,我們還以BRI<,3>編碼蛋白質的C端作為誘餌蛋白,利用酵母雙雜