SVCV G蛋白與宿主蛋白14--3--3β-α--A相互作用的研究.pdf

1、鯉春病毒血癥病毒(Spring Viraemia of Carp Virus，SVCV)屬于彈狀病毒科鯉春病毒屬，是一種嚴(yán)重危害鯉養(yǎng)殖安全的傳染性病原，感染魚(yú)后能引起典型的鯉春病毒血癥(Spring Viraemia of Carp，SVC)。該病在歐洲、亞洲和北美洲的鯉養(yǎng)殖區(qū)是較為常見(jiàn)的流行性疾病，雖然該疾病在我國(guó)還未檢測(cè)到大規(guī)模暴發(fā)，但作為鯉養(yǎng)殖大國(guó)，該病對(duì)我國(guó)的鯉養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)構(gòu)成潛在的巨大威脅。SVCV感染能引起魚(yú)體體表出血、腹水和泄

2、殖孔發(fā)炎等癥狀，嚴(yán)重者導(dǎo)至死亡。目前，SVCV的致病機(jī)理和入侵機(jī)制尚不清楚。SVCV結(jié)構(gòu)蛋白糖蛋白(Glycoprotein，G)位于病毒囊膜上，在病毒入侵細(xì)胞時(shí)的內(nèi)吞過(guò)程中發(fā)揮作用，該蛋白可以決定病毒的血清型。研究表明，SVCV蛋白與宿主蛋白的相互作用對(duì)病毒的免疫逃逸和復(fù)制產(chǎn)生重要影響。因此，研究SVCVG蛋白與宿主蛋白的相互作用對(duì)揭示該病毒的入侵與致病機(jī)理、抗病毒藥物和預(yù)防疫苗的開(kāi)發(fā)具有重要的科學(xué)意義。
　　首先，利用串聯(lián)親和

3、純化(Tandem Affinity Purification，TAP)與質(zhì)譜分析相結(jié)合的方法，在FHM細(xì)胞中篩選出可能與SVCV G蛋白相互作用的宿主蛋白。其次，用激光共聚焦和免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation，Co-IP)共同驗(yàn)證，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明了SVCV G可以與宿主14-3-3β/α-A蛋白發(fā)生相互作用。通過(guò)對(duì)14-3-3β/α-A蛋白序列進(jìn)行比對(duì)和同源性分析，發(fā)現(xiàn)14-3-3β/α-A在哺乳動(dòng)物、鳥(niǎo)類(lèi)、兩棲