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文檔簡介
1、目的:研究TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中的表達及其在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中對腫瘤生物學(xué)特征的影響,旨在尋找與膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展相關(guān)的新的靶基因。
方法:
?。?)運用Western blot方法,檢測在人正常腦組織和膠質(zhì)瘤組織中TRA2β的表達情況;收集80例膠質(zhì)瘤手術(shù)標(biāo)本,應(yīng)用免疫組化方法檢測TRA2β和增殖指標(biāo)Ki-67的表達情況,將兩者的表達情況與患者的臨床病理因素進行相關(guān)性分析。通過Kaplan-Meier法分析TRA2β的表達
2、與膠質(zhì)瘤患者的生存率之間的相關(guān)性;(2)選取高表達TRA2β的膠質(zhì)瘤細(xì)胞株作為研究對象,建立血清饑餓釋放模型,處理后運用Western blot方法檢測TRA2β蛋白表達水平變化,探究其在膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖中的潛在作用。
?。?)通過小干擾的方式下調(diào)細(xì)胞中TRA2β的內(nèi)源性表達,然后采用細(xì)胞流式分析、CCK-8、Transwell等方法檢測TRA2β表達的下調(diào)對細(xì)胞周期、增殖以及遷移的影響。
結(jié)果:
?。?)Wes
3、tern blot及免疫組化均顯示,TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中的表達明顯增高。統(tǒng)計學(xué)分析提示TRA2β的表達強度與膠質(zhì)瘤組織學(xué)分級之間的關(guān)系有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),相關(guān)性分析表明TRA2β與Ki-67表達呈正相關(guān)(r=0.440;P<0.045);Kaplan-Meier分析顯示TRA2β在膠質(zhì)瘤中的高表達與患者低生存率的顯著相關(guān)(P<0.01);
(2)通過血清饑餓的方式使膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長周期停滯,血清釋放后刺激細(xì)胞增殖;
4、Western blot結(jié)果顯示TRA2β﹑PCNA等蛋白隨著細(xì)胞周期的進展表達增加;siRNA分析顯示,TRA2β表達的下調(diào)可引起PCNA、cyclin A表達降低,同時使細(xì)胞周期的停滯、增殖水平及遷移能力的下降。
結(jié)論:
?。?)TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中表達增加;TRA2β的高表達增加腫瘤分級正相關(guān)并提示不良預(yù)后;說明TRA2β可能與膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。
?。?)TRA2β的表達在血清饑餓的膠質(zhì)瘤細(xì)胞中逐
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