Klotho蛋白在結(jié)直腸腺癌及結(jié)直腸腺瘤組織中的表達及其臨床意義.pdf

1、結(jié)直腸癌是一種常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤。據(jù)WHO統(tǒng)計2008年全球大腸癌新發(fā)病例約120萬人，死亡病例約608700人。歐洲國家平均每年有20萬人死于結(jié)直腸癌，在所有惡性腫瘤中死亡率位居第二。結(jié)直腸癌的發(fā)病率以及死亡率在我國有明顯的上升趨向。因為特異性的臨床表現(xiàn)在疾病的早期階段并不明顯，較多患者一直到出現(xiàn)消瘦、血便、腹痛等臨床表現(xiàn)時才就醫(yī)，而就醫(yī)的患者中大約有80％明確時就已出現(xiàn)了轉(zhuǎn)移，耽誤了最好的治療機會。因此，尋找結(jié)直腸癌的早期分子標(biāo)

2、志物成為研究熱點，這些研究將有助于結(jié)直腸癌的早期臨床診斷和預(yù)后評價。
　　Klotho蛋白是新近發(fā)現(xiàn)的一種抗衰老相關(guān)蛋白，與多種慢性疾病及衰老相關(guān)性疾病關(guān)系密切。Klotho蛋白具有抗衰老、調(diào)節(jié)鈣磷代謝等作用。近年研究提示Klotho蛋白與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。前期研究表明Klotho mRNA在結(jié)腸癌細(xì)胞株中普遍低表達或沉默表達。Klotho蛋白在結(jié)腸上皮癌變過程中的動態(tài)變化及其與結(jié)直腸癌患者的臨床病理特征關(guān)系尚未有報道

3、。
　　目的：
　　本課題采用免疫組化法對人和小鼠的結(jié)直腸癌、結(jié)直腸腺瘤和結(jié)直腸正常組織Klotho蛋白的表達進行動態(tài)檢測，初步探討其在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其臨床意義。
　　方法：
　　1.收集73例結(jié)直腸腺癌組織和癌旁組織，110例結(jié)直腸腺瘤組織和20例正常結(jié)腸粘膜組織，采用免疫組化法檢測Klotho蛋白的表達情況，詳細(xì)記錄年齡、性別、腫瘤位置、分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等相關(guān)的臨床病理資料，并隨訪

4、73例結(jié)直腸腺癌病人的生存預(yù)后情況，分析Klotho蛋白在結(jié)直腸癌發(fā)生過程中的變化及其與各項臨床病理參數(shù)的關(guān)系。
　　2.使用氧化偶氮甲烷(AOM)+葡聚糖硫酸鈉(DSS)構(gòu)建原位結(jié)腸癌模型，將12只五周齡雄性C57BL/6小鼠，隨機分為正常組和模型組。實驗組小鼠第一天(D1)單劑量腹腔注射AOM(10mg/kg)一次，一周后(D8)正常飲用水換為含有3％DSS的飲用水，連續(xù)飲用5天，D12恢復(fù)正常飲用水16天，21天作為一個DS

5、S周期，一共進行三個DSS周期。對照組腹腔注射與AOM同體積的生理鹽水，正常飲用水直至建模結(jié)束，實驗組和對照組均正常飲食。第10周建模結(jié)束，收集小鼠結(jié)腸組織作病理檢測，免疫組化法檢測Klotho蛋白表達水平。
　　結(jié)果：
　　1.研究共納入276例研究對象，其中結(jié)腸腺癌及配對癌旁組織各73例，結(jié)腸腺瘤110例，健康對照20例。平均年齡60.5歲，在73例結(jié)直腸腺癌中，男性41例，女性28例，平均年齡62.97±11.42歲;

6、在110例結(jié)直腸腺瘤中，男性72例，女性38例，平均年齡56.47±9.27歲;在20例健康體檢者中，男性14例，女16例，平均年齡49.9±13.02歲。三組間一般資料無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　2.免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)Klotho蛋白從正?！倭觥侔┙M織逐漸下降。結(jié)直腸癌患者中，腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移和TNM分期與Klotho蛋白的表達顯著相關(guān)(P＜0.05)。
　　3.采用AOM+DSS成功構(gòu)建腸炎相關(guān)性結(jié)腸癌小鼠