結(jié)直腸腺癌和結(jié)直腸腺瘤相關(guān)生物標志物的臨床病理研究.pdf

1、研究目的
　　 研究生物標志物CD133、CD147、EphA3、LRP16及Ki-67在結(jié)腸腺癌中的表達與腫瘤生物學行為特點并探討上述標志物與患者無瘤生存時間關(guān)系。尋找與結(jié)直腸腺癌預(yù)后相關(guān)的新的分子標志物，以期為臨床治療提供更多的信息，減少復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移。
　　 研究生物標志物CD133及P53在結(jié)直腸腺瘤中表達與腫瘤生物學行為特點并探討在結(jié)直腸腺瘤中上述標志物之間的相關(guān)性。為臨床早期診斷腺瘤癌變提供更多的信息，指導治療。

2、
　　 研究方法
　　 （1）采集解放軍總醫(yī)院病理科1999-2003年間實施根治性手術(shù)切除的并有完整隨訪資料的結(jié)直腸腺癌201例，手工制成組織芯片12塊，進而采用PV9000二步法檢測結(jié)直腸腺癌相關(guān)標志物CD133、CD147、EphA3、LRP16及Ki-67在結(jié)直腸腺癌組織中的表達，分析其與臨床病理特征及患者預(yù)后的關(guān)系。采集2004-2009年間實施手術(shù)或內(nèi)鏡下切除的結(jié)直腸腺瘤172例，用PV9000二步法檢測結(jié)直

3、腸腺瘤相關(guān)標志物CD133及P53在結(jié)直腸腺瘤中表達，分析其與臨床病理學特征的關(guān)系。
　　 （2）Western印記雜交法比較20例結(jié)直腸腺癌組織與相對應(yīng)的癌旁正常組織中CD133和EphA3蛋白表達的不同。
　　 （3）RT-PCR檢測CD133基因的mRNA和在18例結(jié)直腸腺癌組織和相應(yīng)的癌旁正常組織中的表達情況。
　　 結(jié)果
　　 （1）CD133、CD147、EphA3、LRP16及Ki-67的表

4、達隨腫瘤浸潤程度加深而增高（P<0.05）；CD133、CD147、EphA3、LRP16及Ki-67的表達隨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目增多而增高（P<0.05）；CD133、CD147、LRP16及Ki-67在有腹腔及遠處轉(zhuǎn)移組的表達均明顯高于無轉(zhuǎn)移組（P<0.05）；CD133、CD147、EphA3、LRP16及Ki-67的表達均隨TNM分期遞增而增高[P<0.05）；CD147、LRP16及Ki-67的表達隨腫瘤分化程度的降低而升高。

5、>　　 （2）Ki-67在結(jié)直腸腺癌中表達與CD133、CD147及LRP16呈正相關(guān)（相關(guān)系數(shù)分別為：r=0.498，r=0.380，r=0.394，P<0.05）。
　　 （3）CD133、CD147、EphA3、LRP16及Ki-67在癌組織中的表達明顯高于癌旁正常組織（P<0.05）.
　　 （4）單因素術(shù)后生存分析顯示：CD133、CD147、EphA3、LRP16、Ki-67、腫瘤大體類型、分化程度、浸潤深

6、度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腹腔及遠處轉(zhuǎn)移和TNM分期這11種因素與患者的術(shù)后生存時間相關(guān)（P<0.05）。
　　 （5）COX多因素生存分析顯示：CD147及LRP16的陰性表達、腫瘤組織學分級低、腫瘤腸壁浸潤深度淺、未發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移及TNM分期低的患者術(shù)后生存時間長，預(yù)后較好（P<0.05）。
　　 （6）對20例新鮮結(jié)直腸癌手術(shù)標本進行蛋白提取及定量，并通過Western印跡雜交法比較結(jié)直腸腺癌組織與癌旁正常組織中CD133及E

7、phA3蛋白表達異同的實驗結(jié)果顯示，結(jié)直腸腺癌及癌旁組織均能與兔抗人CD133多克隆抗體及兔抗人EphA3多克隆抗體有特異性結(jié)合，分別在95kD處和135kD處可見有深染條帶，而且結(jié)直腺腸癌組織標本CD133及EphA3蛋白的表達均高于相應(yīng)的癌旁正常組織（P<0.05）。
　　 （7）對18例新鮮結(jié)直腸腺癌手術(shù)標本進行RT-PCR檢測結(jié)果顯示，CD133mRNA在癌組織中表達高于相應(yīng)的癌旁正常組織（P<0.05）。
　　

8、 （8）CD133及p53在結(jié)直腸腺瘤中表達與腫瘤大小，病變程度及腫瘤組織學分型有關(guān)（P均<0.05）。
　　 （9）CD133和P53在結(jié)直腸腺瘤中的表達呈正相關(guān)（r=0.344，P<0.05）。
　　 （10）CD133及p53在腺瘤組織中表達明顯高于正常粘膜組織（P<0.05）.
　　 結(jié)論
　　 （1）CD133、CD147、EphA3、LRP16及Ki-67在結(jié)直腸腺癌的表達情況與患者術(shù)后生存時

9、間相關(guān)，Ki-67在結(jié)直腺腸癌中表達與CD133、CD147及LRP16相關(guān)。
　　 （2）CD147、LRP16、組織學分級、浸潤深度、腹腔及遠處轉(zhuǎn)移及TNM分期是結(jié)直腸腺癌術(shù)后生存時間的獨立預(yù)后因子。
　　 （3）CD133、CD147、EphA3、LRP16及Ki-67均與結(jié)直腸腺癌的發(fā)生發(fā)展和（或）轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，上述生物標志物可能對結(jié)直腸腺癌的演化和進展起重要作用，并可能成為新的臨床輔助診斷和監(jiān)測預(yù)后的指標。