右美托咪定對(duì)大鼠高氧性急性肺損傷的干預(yù)研究.pdf

1、目的：
　　研究不同劑量右美托咪定（Dexmedetomidine，DEX）對(duì)SD大鼠高氧性急性肺損傷（hyperoxia-induced acute lung injury，HALI）有無(wú)保護(hù)作用以及對(duì)HALI細(xì)胞凋亡的影響，為HALI的防治提出新的臨床參考用藥，也為拓展右美托咪定的臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　　方法：
　　健康雄性SD大鼠共60只，按不同處理方式，采用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為五組，每組12只（n=12）

2、，分別為：I組（空氣＋生理鹽水組）、II組（高氧＋生理鹽水組）、III組（高氧＋右美托咪定25μg/Kg.d組）、IV組（高氧＋右美托咪定50μg/Kg.d組）、V組（高氧＋右美托咪定100μg/Kg.d組）。II~V組建模前30min腹腔注射DEX或生理鹽水。II、III、IV、V組大鼠于高氧箱中喂養(yǎng)，控制箱內(nèi)氧濃度90％以上、溫度24～26℃、濕度50％～70％、CO2濃度<0.5％，每日持續(xù)供氧23.5h，定時(shí)開(kāi)箱腹腔給藥，同時(shí)更

3、換墊料、補(bǔ)充鼠糧及水等，控制開(kāi)箱時(shí)間小于30分鐘。在實(shí)驗(yàn)48h（T1）及72h（T2）兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，各組分別抽取6只大鼠觀察一般情況；麻醉后行動(dòng)脈血?dú)夥治?，?jì)算氧合指數(shù)（Oxygenation Index，OI）以及呼吸指數(shù)（Respiratory Index， RI）；留取血清ELISA法檢測(cè)血清IL-6、IL-1β、TNF-a；觀察肺組織大體變化；取右下肺行HE染色，光鏡下進(jìn)行病理評(píng)分；左肺石蠟包埋、TUNEL法檢測(cè)并計(jì)算肺組織細(xì)胞凋

4、亡指數(shù)。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠一般情況：I組大鼠各時(shí)相反應(yīng)良好。II組大鼠高氧耐受12 h后逐漸出現(xiàn)少食懶動(dòng)、呆滯、毛發(fā)暗淡、氣促，口鼻、四肢及尾部遠(yuǎn)端不同程度發(fā)紺，隨高氧暴露時(shí)間延長(zhǎng)呈加重表現(xiàn)，48h以后逐漸出現(xiàn)高氧依賴現(xiàn)象，少數(shù)口鼻腔可見(jiàn)血性分泌物。III組大鼠一般表現(xiàn)與II組類似，IV組、V組大鼠腹腔給藥后安靜，無(wú)呼吸抑制。精神、飲食可，氣促、發(fā)紺程度明顯減輕，一般狀態(tài)優(yōu)于II組，五組大鼠在實(shí)驗(yàn)觀測(cè)過(guò)程中均無(wú)死亡。

5、
　　2.呼吸功能的變化：同一時(shí)相I組、II組間比較，II組OI值明顯低于I組，RI值高于I組（均P<0.05）。同一時(shí)相II、III、IV、V組間相比較，II、III組間OI、RI值差異均不顯著（均P>0.05），IV、V組OI均高于II組，RI均低于II組（均P<0.05）， IV、V組OI、RI無(wú)明顯差異（均P>0.05）。
　　3.肺組織病理觀察
　　3.1 大體觀察：I組肺組織呈淡粉色，色澤均勻，柔軟，無(wú)腫脹

6、、出血及壞死。II組高氧暴露48h肺組織色澤變暗、水腫、質(zhì)韌，可見(jiàn)散在出血點(diǎn)；72h肺損傷進(jìn)一步加重，呈暗紅色，病變分布不均，肺出血點(diǎn)增多、融合，少數(shù)甚而出現(xiàn)淡黃色或血性胸水。III組肺損傷表現(xiàn)與II組類似，IV組、V組同一時(shí)相肺損傷程度較II組減輕，未見(jiàn)胸腔積液出現(xiàn)。
　　3.2 光鏡下改變：I組肺泡結(jié)構(gòu)清晰，未見(jiàn)明顯炎性細(xì)胞；II組48h見(jiàn)肺組織結(jié)構(gòu)紊亂，肺泡壁完整性破壞，肺間隔略增寬，散在炎癥細(xì)胞、紅細(xì)胞聚集，部分肺泡腔可見(jiàn)

7、水腫液，72h肺病理結(jié)構(gòu)改變較48h加重，甚至出現(xiàn)彌漫性肺水腫；III組病理改變與II類似；IV、V組各時(shí)相肺組織損傷程度較II組明顯減輕。
　　3.3 肺組織病理評(píng)分：I組、II組間：同一時(shí)相II組的病理評(píng)分均明顯高于I組（均P<0.05）。II、III、IV、V組間比較：T1時(shí)相II組、III組病理評(píng)分差異不顯著（P>0.05）， T2時(shí)相II組病理評(píng)分高于III組（P<0.05），IV組、V組肺病理評(píng)分均低于II組（均P<0

8、.05），IV組、V組病理評(píng)分無(wú)明顯差異（均P>0.05）。
　　4.ELISA法檢測(cè)血清TNF-a、IL-6、IL-1β：I組、II組間：同一時(shí)相II組大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-a值較I組顯著升高（均P<0.05）；同一時(shí)相II、III、IV、V組間比較：II組、III組IL-6、IL-1β、TNF-a值無(wú)顯著差異（均P>0.05）；IV組、V組血清IL-6、IL-1β、TNF-a值均低于II組（均P<0.05），而

9、IV、V組間差異不顯著（均P>0.05）。
　　5.肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)：I組、II組比較，II組各時(shí)間點(diǎn)凋亡指數(shù)較I組明顯增高（均P<0.05）。同一時(shí)相II、III、IV、V組間比較：T1時(shí)相II組與III組間凋亡指數(shù)無(wú)顯著差異（P>0.05），T2時(shí)相II組凋亡指數(shù)高于III組（P<0.05），IV、V組凋亡指數(shù)均較II組低（均P<0.05），而IV、V組間差異不大（均P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.連續(xù)吸入

10、高濃度氧（>90%）可導(dǎo)致大鼠肺組織結(jié)構(gòu)及呼吸功能受損，肺氧合指數(shù)降低，呼吸指數(shù)升高，病理表現(xiàn)為肺結(jié)構(gòu)紊亂、肺泡壁融合、肺泡毛細(xì)血管擴(kuò)張、肺泡間隔增寬、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、肺泡腔內(nèi)可見(jiàn)粉紅色滲出液。連續(xù)吸入高濃度氧48h以上可成功建立典型的HALI大鼠模型。
　　2.持續(xù)高濃度氧暴露可導(dǎo)致大鼠肺炎癥反應(yīng)，肺組織細(xì)胞凋亡增多、炎癥因子上升，對(duì)大鼠HALI模型應(yīng)用50μg/Kg.d、100μg/kg.d的DEX腹腔注射可抑制肺的炎癥反應(yīng)和損