右美托咪定對ConA誘導(dǎo)肝損傷的保護作用及機制研究.pdf

1、目的：
　　本實驗旨在探討右美托咪定（Dexmedetomidine,DEX）對Con A誘導(dǎo)肝損傷小鼠的保護作用及其可能的潛在作用機制。
　　方法：
　　1.將雄性C57/BL小鼠隨機分為3組：生理鹽水組（normal saline,NS）：通過小鼠尾靜脈注射生理鹽水(100μl)作為預(yù)處理的對照，隨后再次通過尾靜脈注射生理鹽水(100μl)；Con A組(Con A組)：經(jīng)小鼠尾靜脈注射生理鹽水(100μl)預(yù)處理

2、，隨后再次通過尾靜脈注射Con A(20mg/kg)；DEX處理組(DEX組)：經(jīng)小鼠尾靜脈注射DEX(25μg/kg)預(yù)處理，隨后再次通過尾靜脈注射Con A(20mg/kg)。
　　2.各組小鼠建模后12h，檢測外周血血漿中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）濃度，評估Con A導(dǎo)致肝臟損傷的程度。
　　3.各組小鼠建模后12h，通過病理切片觀察肝臟損傷程度。
　　4.各組小鼠建模后12h，采用流

3、式細胞術(shù)檢測各組小鼠肝臟CD4+T、CD8+T淋巴細胞數(shù)目以及CD3+CD25+T、CD4+CD25+T、CD8+CD25+T淋巴細胞百分比。
　　5.各組小鼠建模后12h，ELISA法檢測外周血血漿中TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-10等細胞因子的濃度。
　　6.各組小鼠建模后12h，實時熒光定量PCR法（RT-PCR）檢測肝臟CXCL-10 mRNA表達水平。
　　7.各組小鼠建模后12h,Western

4、Blot法檢測肝臟NF-κB信號通路關(guān)鍵分子活化水平。
　　結(jié)果：
　　1.Con A組小鼠外周血血漿中ALT、AST濃度明顯高于NS組及DEX組。然而，NS組與DEX組的血清AST、ALT差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.肝組織HE染色可見，Con A組小鼠大量肝細胞壞死，DEX組肝臟損傷的嚴重程度較Con A組明顯減輕；Con A組、DEX組之間小鼠肝臟損傷嚴重程度評分具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P均﹤0.01)。
　　

5、3.與NS組及DEX組相比，Con A組肝臟CD4+T細胞絕對數(shù)量增加，且CD4+CD25+T細胞百分比的升高。Con A組CD8+T細胞數(shù)量雖然沒有顯著增加，但與NS組及DEX組相比CD8+CD25+T細胞百分比明顯升高。此外，Con A組CD3+CD25+T細胞百分比也明顯升高。
　　4.與Con A組比較，DEX組小鼠血漿中細胞因子TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-10的濃度顯著降低(P均﹤0.01)。
　　5.

6、與Con A組相比，DEX組小鼠肝臟組織中CXCL-10 mRNA表達水平顯著降低(P﹤0.01)。
　　6.與Con A組相比，DEX組小鼠肝臟組織中NF-κB信號通路中關(guān)鍵分子p65和IκBα磷酸化水平明顯降低。
　　結(jié)論：
　　1.右美托咪定（DEX）可降低Con A誘導(dǎo)肝損傷小鼠外周AST、ALT水平，減輕肝損傷程度。
　　2.DEX可能是通過抑制NF-κB活化，減少炎癥因子（TNF-α、IFN-γ、IL