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1、本實(shí)驗(yàn)用改良的Richard培養(yǎng)液培養(yǎng)水稻紋枯病菌,濾液經(jīng)活性炭吸附、甲醇洗脫、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后獲得粗毒素。以粗毒素處理水稻種子,毒素可顯著抑制胚根生長(zhǎng),且濃度越高,毒性越強(qiáng)。 水稻紋枯病菌粗毒素對(duì)水稻葉鞘和葉片細(xì)胞膜有明顯的損傷作用。毒素處理后,細(xì)胞膜透性改變,細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)外漏。當(dāng)毒素稀釋5-10倍時(shí),細(xì)胞膜損傷率達(dá)80%以上,且處理時(shí)間越長(zhǎng),細(xì)胞膜損傷越重。另外,毒素處理對(duì)水稻植株中葉綠素含量有較大抑制作用。當(dāng)毒素稀釋10倍時(shí),葉綠
2、素含量比對(duì)照減少85%以上。并且,毒素濃度越高,處理時(shí)間越長(zhǎng),水稻葉綠素含量越低。 電鏡觀察結(jié)果表明,水稻紋枯病菌粗毒素對(duì)水稻葉鞘細(xì)胞及其超微結(jié)構(gòu)具有顯著的破壞作用。毒素處理12h后,葉綠體膜破損,基粒片層松散、腫脹,出現(xiàn)空腔;處理36h后,葉綠體基本解體,線粒體等其它細(xì)胞器也消解,細(xì)胞壁部分變薄、疏松。 水稻紋枯病菌粗毒素對(duì)水稻葉鞘和葉片體內(nèi)過(guò)氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和超氧化歧
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