肺纖維化小鼠中IL-33、ST2信號(hào)通路的動(dòng)態(tài)改變及意義研究.pdf

1、目的:探討IL-33/ST2信號(hào)通路在博來霉素(bleomycin，BLM)誘導(dǎo)的肺纖維化模型中的變化及其作用，進(jìn)一步探索特發(fā)性肺纖維化的發(fā)病機(jī)制。
　　 方法:隨機(jī)數(shù)字表法將40只小鼠分為2組:對(duì)照組（Cont組）、模型組(BLM組)，每組20只。BLM組氣管內(nèi)注射配置好的博來霉素溶液5mg·kg-1(0.04ml)，Cont組注入等體積(0.04ml)生理鹽水（方法同上），各組分別于造模后第3、7、14和28天隨機(jī)處死5只小

2、鼠。HE染色檢測(cè)肺泡炎癥程度;Masson染色法檢測(cè)纖維化程度;TUNEL細(xì)胞凋亡試劑盒檢測(cè)肺上皮細(xì)胞凋亡;免疫組化法檢測(cè)白介素33(IL-33)，α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)和上皮型鈣粘蛋白(E-cad)的動(dòng)態(tài)表達(dá);Westernblotting檢測(cè)蛋白IL-33、α-SMA、E-cad、ST2、MyD88、TRAF6的表達(dá);酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)小鼠肺組織中IFN-γ、IL-4、IL-13水平。
　　 結(jié)果:

3、(1)肺組織病理學(xué)改變:與對(duì)照組比較，BLM組肺泡炎等級(jí)在第3、7、14、28天差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);肺纖維化程度在第7、14、28天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);
　　 (2)肺組織中蛋白IL-33、E-cad、α-SMA、ST2、MyD88、TRAF6的動(dòng)態(tài)表達(dá):BLM組IL-33表達(dá)先上升后下降，第7天達(dá)到高峰，在第3、7天與對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);E-cad第14天表達(dá)開始下降，第28

4、天最低，第14、28天與對(duì)照組有顯著性差異(P＜0.05);α-SMA自第3天表達(dá)逐漸增強(qiáng)，第28天達(dá)高峰，在第3、7、14、28天均與對(duì)照組有顯著性差異(P＜0.05);肺組織中ST2、MyD88、TRAF6的表達(dá)量第3天開始上升，三種蛋白呈現(xiàn)出一致的上升趨勢(shì)，與對(duì)照組比較，差異在第3、7、14、28天均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);
　　 (3)TUNEL顯示BLM組在第7天凋亡細(xì)胞數(shù)最多;
　　 (4)各組小鼠肺組

5、織IFN-γ、IL-4、IL-13含量:BLM組IL-4、IL-13含量自第7天開始升高，在第7、14、28天與對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);在肺纖維化早期肺組織中IFN-γ/IL-4≥1，而在肺纖維化后期IFN-γ/IL-4≤1，與對(duì)照組相比，在第14、28天的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:(1)肺纖維化過程中存在損傷/凋亡及增殖失衡現(xiàn)象即肺泡上皮細(xì)胞過度損傷/凋亡及成纖維細(xì)胞增殖的失控;