Wnt信號通路在LPS所致的ARDS早期肺纖維化中作用.pdf

1、目的：
　　本實驗以脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)誘發(fā)小鼠急性肺損傷，通過相關方法證明在ARDS早期已發(fā)生纖維化，通過觀察肺組織wnt信號通路核心元件beta-catenin的mRNA表達的變化，探討wnt信號通路在ARDS早期所致的肺纖維化中可能發(fā)揮的作用及其相關調節(jié)機制。
　　方法：
　　建立ARDS模型:主要根據(jù)二次打擊學說建立ARDS動物模型[1]。
　　32只雄性SD大鼠隨機分為

2、4組:對照組（8只）:第一天腹腔內注射生理鹽水(10ml/day)觀察24小時。實驗組（24只）分成3組:實驗組1:第一天腹腔注射LPS(8 mg/kg)[2];觀察24小時;實驗組2:第一天和24h后腹腔注射LPS（8 mg/kg）觀察48小時;實驗組3:第一天和24h后腹腔注射LPS(8 mg/kg)觀察7天;后予水合氯醛麻醉后，固定于操作臺上，并于無菌環(huán)境下取出肺組織。
　　通過觀察一般情況，肺組織濕干重，血氣分析，HE染色

3、觀察肺組織炎癥損傷的程度;
　　通過Masson染色觀察膠原纖維;
　　通過Real Time PCR技術檢測肺組織中wnt信號通路核心分子:beta-catenin的mRNA表達水平。
　　結果：
　　1、正常組大鼠未見明顯異常表現(xiàn);實驗組大鼠觀察可觀察到在內毒素腹腔注射后大鼠出現(xiàn)蜷縮少動、發(fā)抖、呼吸急促，不思飲食等表現(xiàn)。
　　2、濕干重比值結果:實驗組與對照組比較肺濕干重比值明顯不同，實驗組干濕重比明顯

4、大于對照組(p＜0.05)，并且在48小時肺水腫最嚴重。
　　3、動脈血氣分析結果:實驗組與對照組比較氧合指數(shù)明顯不同，實驗組氧合指數(shù)明顯低于對照組(p＜0.05)，并且在48小時氧合指數(shù)最低。
　　4、肺組織HE染色:實驗組與對照組比較HE染色結果不同，對照組肺組織結構清晰完整，無充血滲出，炎細胞侵潤。實驗組肺組織結構不完整，有充血，滲出，炎細胞侵潤。
　　5、肺組織Masson染色:對照組僅在血管及支氣管周圍見到少