用轉(zhuǎn)座子與RNA-DNA嵌合寡核苷酸探討靶向性基因治療.pdf

1、基因治療是指將遺傳物質(zhì)導(dǎo)入患者體內(nèi),以使患者獲得有益治療的一種新型治療方式.目前限制基因治療的主要障礙是基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)不能滿足臨床要求.在臨床方案中應(yīng)用較為廣泛的病毒載體和非病毒載體存在的主要不足是基因轉(zhuǎn)移效率達(dá)不到臨床要求及載體沒(méi)有靶向性.一般來(lái)說(shuō),基因治療的靶向性分為三個(gè)水平:組織特異性的基因轉(zhuǎn)移、轉(zhuǎn)移基因整合的特異性及轉(zhuǎn)移基因的適宜表達(dá).近年來(lái),很多實(shí)驗(yàn)室認(rèn)識(shí)到其重要性并開始從事該方面研究.目前靶向性基因治療已成為基因治療領(lǐng)域熱點(diǎn)之

2、一.該研究以多種人源細(xì)胞系為模型,探討了RNA/DNA寡核苷酸對(duì)基因組中與HPFH相關(guān)的位點(diǎn)的突變作用.結(jié)果發(fā)現(xiàn)嵌合體修復(fù)術(shù)可突變Aγ與Gγ基因的調(diào)控序列.通過(guò)有限稀釋,篩選到靶位點(diǎn)已成功突變的單細(xì)胞克隆.表明該種技術(shù)可望應(yīng)用于各種類型的β地貧基因治療.另外人們發(fā)現(xiàn)不同細(xì)胞系對(duì)嵌合體的反應(yīng)性不同.熒光標(biāo)記的寡核苷酸轉(zhuǎn)染試驗(yàn)說(shuō)明寡核苷酸轉(zhuǎn)染Hela、K562等細(xì)胞效率相近,但在Hela及CMK細(xì)胞中能檢測(cè)到定點(diǎn)突變作用,而在K562及HE