完全性雄激素不敏感綜合征一家系基因突變分析.pdf

1、雄激素不敏感綜合征（Androgen Insensitivity Syndrome，AIS），是一種常見(jiàn)的男性假兩性畸形。是伴X連鎖隱性遺傳病?；颊呷旧w核型為46，XY，但其X染色體上的雄激素受體(Androgen receptor，AR)基因存在缺陷，可致雄激素靶器官上的AR出現(xiàn)缺陷，體內(nèi)的雄激素不能發(fā)揮相應(yīng)的作用而出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀。此疾病可對(duì)患者的生殖能力造成不同程度的影響，還可能引發(fā)與性發(fā)育異常相關(guān)的性心理、性行為的異常，并可

2、能給社會(huì)和患者家庭造成難以挽回的損失。目前基因診斷是AIS診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，其致病基因一直在不斷的被發(fā)現(xiàn)，目前有研究表明此綜合征的遺傳背景較為復(fù)雜多樣，故繼續(xù)發(fā)掘其新的致病基因，將有助于說(shuō)明與建立疾病的表型與致病基因型之間的關(guān)聯(lián)。
　　研究目的：
　　明確AIS家族致病基因，建立基因型和表型之間的關(guān)聯(lián)，為其家族成員后續(xù)的遺傳咨詢(xún)及產(chǎn)前診斷提供依據(jù)。
　　研究方法：
　　收集2015年就診于廈門(mén)市婦幼保健院婦科門(mén)診被診

3、斷為“雄激素不敏感綜合征”的患者和其同胞姐姐(同樣為AIS)及其另一個(gè)正常同胞姐姐的臨床資料和外周血液樣本，提取上述三個(gè)樣本的外周血全基因組DNA，對(duì)此三例樣本的全基因組DNA應(yīng)用二代測(cè)序技術(shù)進(jìn)行全外顯子測(cè)序。進(jìn)一步收集家族中其他9位成員的外周血液樣本并進(jìn)行全基因組DNA的提取，應(yīng)用一代測(cè)序?qū)易逯械倪@9位成員以及上述三姐妹進(jìn)行二代測(cè)序結(jié)果的驗(yàn)證。應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)上述家族中的12個(gè)樣本進(jìn)行SRY（Y染色體上的性別決定基因）基

4、因和Y染色體AZF（無(wú)精子因子）a、AZFb、AZFc缺失情況檢測(cè)。通過(guò)檢Ⅲ-1的5α-脫氫酶活性濃度及其同一次采血所得的血液樣本的睪酮(T)和二氫睪酮(DHT)的值來(lái)驗(yàn)證Ⅲ-1的5α-脫氫酶活性是否正常。
　　研究結(jié)果：
　　1.二代測(cè)序發(fā)現(xiàn)Ⅲ-1和Ⅲ-3存在AR:c.2566 C＞T(R856C)突變。2.一代測(cè)序發(fā)現(xiàn)Ⅲ-1和Ⅲ-3存在AR:c.2566 C＞T(R856C)突變，Ⅱ-2存在AR:c.2566C＞T(R8

5、56C)雜合突變，家族中其他成員均不存在此突變。3.SRY基因和Y染色體AZFa、AZFb、AZFc缺失情況的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)兩患者和其家族其他男性基因型成員均存在SRY基因和無(wú)Y染色體AZFa、AZFb、AZFc的缺失。4.5α-脫氫酶活性濃度檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Ⅲ-1的5α-脫氫酶活性濃度正常。
　　研究結(jié)論：
　　AR:c.2566 C＞T(R856C)突變是造成此家系A(chǔ)IS的致病原因，來(lái)自于患者的母親的自發(fā)突變。5α-脫氫酶活性不是造成