人冠狀動(dòng)脈粥樣病灶內(nèi)CD40L水平與病灶結(jié)構(gòu)變化的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　為了探討CD40-CD40L信號(hào)在人冠狀動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）病灶發(fā)生發(fā)展的作用，本課題進(jìn)行了人冠狀動(dòng)脈AS病灶結(jié)構(gòu)變化的觀察和病灶內(nèi)CD40L、MMP-9表達(dá)水平的檢測(cè)。
　　方法：
　　收集人冠狀動(dòng)脈AS血管60例作為實(shí)驗(yàn)組，按照病理分期分為四組：脂紋期5例，纖維斑塊期19例，粥樣斑塊期18例，繼發(fā)改變期18例；以無(wú)病變冠狀動(dòng)脈12例為對(duì)照組。常規(guī)HE染色觀察兩組人群冠狀動(dòng)

2、脈的組織結(jié)構(gòu)并用圖像分析軟件測(cè)量病灶結(jié)構(gòu)的相關(guān)指標(biāo)，免疫組化（Immunohistochemistry，IHC）SP兩步法檢測(cè)CD40L、MMP-9蛋白表達(dá)水平，逆轉(zhuǎn)錄-實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Reverse transcription-quantitative real time PCR，RT-qPCR）法檢測(cè)CD40L、MMP-9 mRNA表達(dá)水平，分析CD40L、MMP-9表達(dá)水平與冠脈AS病灶結(jié)構(gòu)變化之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：<

3、br>　　1.對(duì)照組冠脈管壁薄，內(nèi)膜、中膜、外膜各層結(jié)構(gòu)厚度均勻一致，內(nèi)膜平滑完整。實(shí)驗(yàn)組肉眼呈從脂紋期到繼發(fā)病變期的不同變化，病變使冠脈出現(xiàn)不同程度的管壁增厚和管腔狹窄，部分病灶內(nèi)可見(jiàn)鈣化、出血、血栓形成等；光鏡下輕者僅見(jiàn)泡沫細(xì)胞增生，血管壁厚度及管腔無(wú)明顯改變；重者出現(xiàn)明顯粥樣壞死灶，甚至斑塊內(nèi)出血或血栓形成，血管壁顯著增厚，管腔明顯狹窄。2.對(duì)照組血管壁內(nèi)未見(jiàn)CD40L表達(dá)，實(shí)驗(yàn)組CD40L表達(dá)水平明顯增高，陽(yáng)性表達(dá)主要分布于AS

4、病灶肩區(qū)、基底部、纖維帽區(qū)域及壞死灶周圍的泡沫細(xì)胞及炎細(xì)胞胞漿，CD40L平均光密度值測(cè)定顯示實(shí)驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），且實(shí)驗(yàn)組內(nèi)各期病變CD40L水平具有顯著性差異（P＜0.05）。3.對(duì)照組血管壁可見(jiàn)MMP-9蛋白少量表達(dá)于中膜平滑肌細(xì)胞及內(nèi)膜泡沫細(xì)胞的胞漿；實(shí)驗(yàn)組冠脈AS病灶內(nèi)可見(jiàn)MMP-9蛋白大量表達(dá)于泡沫細(xì)胞及炎細(xì)胞，以粥樣斑塊肩區(qū)、基底部、纖維帽區(qū)域及壞死灶周圍明顯，另可見(jiàn)少量表達(dá)于中膜平滑肌細(xì)胞。平均光密度值測(cè)

5、定顯示，實(shí)驗(yàn)組MMP-9水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；且不同病變階段的病灶內(nèi)MMP-9表達(dá)水平存在顯著性差異（P＜0.05）。4.RT-qPCR法檢測(cè)冠脈組織中CD40L、MMP-9 mRNA水平，結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組CD40L水平高于對(duì)照組（P＜0.05），進(jìn)一步比較僅繼發(fā)病變期高于對(duì)照組（P＜0.05）；MMP-9 mRNA實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較，無(wú)論組間或組內(nèi)，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。5.蛋白CD40L與MMP-9的表達(dá)水

6、平呈正相關(guān)，且二者與內(nèi)膜最厚處厚度、壞死灶厚度、血管狹窄程度呈正相關(guān)（P＜0.05），與纖維帽厚度分?jǐn)?shù)有一定的負(fù)相關(guān)趨勢(shì)。
　　結(jié)論：
　　1.人冠脈AS病灶內(nèi)CD40L表達(dá)水平明顯增強(qiáng)。2.人冠脈AS病灶內(nèi)MMP-9高表達(dá)，并與CD40L表達(dá)水平正相關(guān)，與病灶結(jié)構(gòu)指標(biāo)變化有關(guān)。3.人冠脈AS病灶內(nèi)CD40L可能促進(jìn)MMP-9表達(dá)，使病灶內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）降解加速，最終導(dǎo)致病灶結(jié)