2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、乳腺癌是女性中發(fā)病率高,危害大的癌癥之一,嚴(yán)重影響女性的身心健康。治療乳腺癌的難點(diǎn)在于乳腺癌細(xì)胞具有很強(qiáng)的浸潤與轉(zhuǎn)移能力,這也是造成乳腺癌患者死亡率高的主要原因。因此對(duì)乳腺癌細(xì)胞浸潤與轉(zhuǎn)移機(jī)制的深入研究,對(duì)乳腺癌的預(yù)防以及臨床治療具有重要意義。
  骨橋蛋白(Osteopontin,OPN)是一種磷酸化糖蛋白,它可以在胞內(nèi)發(fā)揮作用,也可以分泌到細(xì)胞外發(fā)揮其生理功能。OPN可以參與到許多生理病理過程中,如炎癥反應(yīng),免疫反應(yīng),細(xì)胞凋亡

2、等。也可通過與細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合,介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的粘附、浸潤與轉(zhuǎn)移。但是,目前對(duì)OPN在腫瘤細(xì)胞中的作用機(jī)制還不清楚,需要更深入的研究。
  TLR(Toll-like receptors,Toll樣受體)是一類在人體內(nèi)廣泛存在的并且高度保守的重要的模式識(shí)別受體,能夠識(shí)別并結(jié)合病原相關(guān)分子模式(PAMP),在天然免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用。近來研究表明,多種腫瘤細(xì)胞中也有TLR表達(dá),并與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及浸潤與轉(zhuǎn)移具有一定相關(guān)

3、性,但目前對(duì)其作用機(jī)制尚不清楚。
  實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn),TLR2和OPN在兩種乳腺癌細(xì)胞MCF-7(低轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞)和MDA-MB-231(高轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞)中存在差異性表達(dá),MCF-7細(xì)胞中OPN和TLR2的表達(dá)均低于MDA-MB-231。還有研究表明TLR2和OPN分別在乳腺癌細(xì)胞的浸潤轉(zhuǎn)移中起促進(jìn)作用,那么TLR2對(duì)乳腺癌細(xì)胞的浸潤與轉(zhuǎn)移作用是否與OPN有關(guān)系呢?二者又是通過什么機(jī)制相互作用的呢?為了解決以上疑問,本實(shí)驗(yàn)

4、選取 MDA-MB-231細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移的乳腺癌細(xì)胞)為研究對(duì)象,通過Pam3CSK4(TLR1-TLR2二聚體的激活劑)和LTA(TLR2的激活劑)激活TLR2信號(hào)通路,研究OPN的表達(dá)變化情況,進(jìn)而研究TLR2與OPN在腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移中的作用機(jī)制,為乳腺癌的臨床治療提供理論依據(jù)。
  本論文利用MTT法、細(xì)胞創(chuàng)口愈合實(shí)驗(yàn)、Transwell基質(zhì)膠細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)以及軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)等技術(shù)手段,檢測(cè)了Pam3CSK4和LTA對(duì)乳腺癌

5、細(xì)胞MDA-MB-231的增殖、遷移、侵襲及非錨定生長能力的影響。結(jié)果表明,Pam3CSK4和LTA的刺激能夠促進(jìn)MDA-MB-231細(xì)胞的增殖、浸潤與遷移能力。
  利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)了乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231在Pam3CSK4和LTA刺激后TLR2和OPN各亞型的基因表達(dá)變化。結(jié)果顯示,Pam3CSK4和LTA的刺激均能顯著提高TLR2基因的表達(dá),且二者的刺激能夠顯著上調(diào)OPN各亞型基因的表達(dá)。ELISA檢測(cè)表明

6、,Pam3CSK4和LTA刺激對(duì)iOPN和sOPN蛋白的表達(dá)具有明顯上調(diào)作用。
  利用腫瘤轉(zhuǎn)移PCR芯片技術(shù)對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的84個(gè)基因的表達(dá)情況進(jìn)行分析。結(jié)果表明Pam3CSK4和LTA刺激乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231后,影響腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的表達(dá)。
  綜上所述,本實(shí)驗(yàn)對(duì)OPN介導(dǎo)的TLR2信號(hào)通路對(duì)乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231浸潤與轉(zhuǎn)移影響的作用機(jī)制進(jìn)行了初步研究,并通過腫瘤轉(zhuǎn)移PCR芯片檢測(cè)了刺激后腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基

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