小鼠主要嗅覺(jué)表皮組織內(nèi)AC3缺失對(duì)相關(guān)因子及信號(hào)通路的影響.pdf

1、主要嗅覺(jué)表皮（MOE）組織能夠感受和傳導(dǎo)哺乳動(dòng)物的嗅覺(jué)信號(hào)，是嗅覺(jué)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要化學(xué)感受器官。在MOE組織中，至少有三個(gè)信號(hào)通路介導(dǎo)嗅覺(jué)信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)：環(huán)腺苷酸（cAMP）信號(hào)通路，肌醇1,4,5-三磷酸（IP3）信號(hào)通路和Hedgehog(Hh)信號(hào)通路，其中cAMP信號(hào)通路是嗅覺(jué)傳導(dǎo)的主要通路，腺苷酸環(huán)化酶Ⅲ（AC3）為該信號(hào)通路的重要成員之一。AC3的缺失引起cAMP信號(hào)通路受損，出現(xiàn)嗅覺(jué)喪失，伴隨著雄性攻擊能力、母性關(guān)愛(ài)能力、學(xué)習(xí)與

2、記憶能力及生殖能力下降。研究發(fā)現(xiàn)，MOE組織中存在腺苷酸環(huán)化酶Ⅱ（AC2），AC3，腺苷酸環(huán)化酶Ⅳ（AC4）的表達(dá)，但是，AC3缺失的情況下同工酶AC2與AC4是否在嗅覺(jué)信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮補(bǔ)償作用？MOE組織中的AC3是一種高度的N-糖基化蛋白，β1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶Ⅱ（β3GnT2）的表達(dá)影響AC3的活性及其在神經(jīng)軸突中的定位，那么，AC3的缺失是否引起β3GnT2表達(dá)量的改變？此外，MOE組織中存在部分嗅覺(jué)神經(jīng)元使用IP

3、3信號(hào)通路傳導(dǎo)嗅覺(jué)信號(hào)，Hh信號(hào)通路可影響嗅覺(jué)神經(jīng)元的生長(zhǎng)和分支等，AC3的缺失是否引起IP3，Hh信號(hào)通路的改變，從而影響cAMP信號(hào)通路的信號(hào)傳導(dǎo)？這些問(wèn)題目前為止仍是未知的。為了解釋上述問(wèn)題，本實(shí)驗(yàn)選擇AC3缺失（AC3-/-）小鼠及其同窩出生的野生型（AC3+/+）小鼠的MOE組織，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）及免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)進(jìn)行研究。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴AC3-/-小鼠MOE組織中的三個(gè)AC3相

4、關(guān)因子ac2，ac4，β3gnt2基因水平下調(diào)，且對(duì)應(yīng)蛋白表達(dá)量下調(diào)，AC2，AC4，以及β3GnT2的表達(dá)部位均沒(méi)有發(fā)生改變。⑵AC3-/-小鼠MOE組織中IP3信號(hào)通路的主要基因ltrp1，calm1，calm2下調(diào)，該信號(hào)通路的代表蛋白CaM，IP3KA蛋白表達(dá)量下調(diào)，表達(dá)部位沒(méi)有發(fā)生改變。⑶AC3-/-小鼠MOE組織中Hh信號(hào)通路的主要基因ptch，smo，gli1，gli2基因下調(diào)，代表蛋白PTCH，SMO蛋白免疫熒光染色結(jié)果