AC3敲除小鼠MOE發(fā)育的部分表觀遺傳因子分析.pdf

1、腺苷酸環(huán)化酶3（AC3）在小鼠嗅覺感應的過程中有重要作用。敲除AC3小鼠表現為肥胖，嗅覺喪失，學習及記憶能力下降，主要嗅覺表皮組織（MOE）隨著小鼠生長發(fā)育表現為MOE變薄，組織細胞結構松散，樹突發(fā)育受損等現象。利用基因芯片對AC3敲除小鼠MOE分析發(fā)現，AC3缺失小鼠MOE基因表達發(fā)生顯著變化，包括許多表觀遺傳相關因子表達發(fā)生改變，例如Tet3，BAF53b等。表觀遺傳對細胞發(fā)育過程具有重要的調控作用，研究發(fā)現Tet3過表達影響嗅覺神

2、經元OR基因的表達，BAF53b對神經元刺激誘導的樹突發(fā)育有重要作用，那么 AC3敲除后Tet3與 BAF53b在蛋白水平的變化如何？Tet3是Tet蛋白家族在MOE中表達量最高的，Tet蛋白能夠催化5mC氧化為5hmC，5hmC在神經元中含量豐富并對基因調控和細胞特性有重要作用，AC3敲除對5mC和5hmC有什么影響？H3K27me3在神經分化過程中有重要作用，Tet3的表達伴隨其啟動子區(qū)域H3K27me3水平下降，AC3缺失是否影響

3、 H3K27me3表達？隨著小鼠 MOE發(fā)育，5mC，5hmC，Tet3，H3K27me3和 BAF53b的表達水平有什么變化？這些問題目前尚未得到解決。
　　本文利用免疫熒光染色技術，以AC3敲除（AC3-/-）和野生型（AC3+/+）小鼠為材料，選取7天，30天及90天不同發(fā)育階段，對DNA修飾5mC/5hmC，DNA修飾調控因子TET3，組蛋白賴氨酸修飾H3K27me3，組蛋白結構調節(jié)因子BAF53b進行染色。結果發(fā)現，AC

4、3敲除后，同年齡小鼠 MOE內5mC表達量變化不大，但 Tet3表達量發(fā)生上調，5hmC發(fā)生下調。H3K27me3與 BAF53b表達量在發(fā)生下調。隨著年齡的增長，5hmC、BAF53b和 Tet3的表達量表現為下調，H3K27me3表達量表現為上調，5mC表達量變化不大。結果表明，AC3缺失后，不僅引起了部分表觀遺傳因子發(fā)生差異表達，而且引起了一些表觀遺傳標記在染色體中的水平發(fā)生變化。我們推測，AC3敲除后導致cAMP信號通路受阻，非