杭白菊多糖三種提取方法及體外生理活性的比較研究.pdf

1、杭白菊（Chrysanthemum morifolium）是國家首批藥食同源植物，含豐富的營養(yǎng)成分和活性物質(zhì)。本研究以杭白菊為對(duì)象，分別采用熱水浸提法、超聲波輔助提取法和堿溶液浸提法三種常規(guī)方法提取杭白菊多糖，探討提取方法對(duì)杭白菊多糖理化性質(zhì)和生物活性的影響，并對(duì)提取技術(shù)進(jìn)行優(yōu)化，旨在提高杭白菊多糖的提取率、保證較高的多糖活性，進(jìn)一步提升杭白菊的利用價(jià)值。取得的主要研究結(jié)果如下:
　　1.系統(tǒng)比較了熱水浸提法、超聲輔助提取法及堿溶

2、液浸提法提取杭白菊多糖，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，利用中心組合試驗(yàn)，以多糖提取率為響應(yīng)值對(duì)三種提取方法進(jìn)行提取條件的響應(yīng)面優(yōu)化。結(jié)果表明:熱水浸提法的最佳條件參數(shù)為:提取溫度86℃，料液比1∶25g/mL，樣品粒度＞80目，提取時(shí)間2.1h，提取次數(shù)為1次，在該條件下杭白菊多糖提取率為7.90％;超聲輔助提取法的最佳工藝條件為:超聲時(shí)間27min，超聲溫度61℃，料液比1∶25g/mL，超聲功率104W，在該條件下杭白菊多糖理論提取率為8.

3、38％。堿溶液浸提法的最佳工藝條件為:NaOH濃度0.40mol/L，提取溫度89℃，提取時(shí)間2.0h，料液比1∶26g/mL，在該條件下多糖理論提取率為7.79％。結(jié)果表明:超聲輔助提取法的多糖提取率顯著高于其他兩種方法。掃描電子顯微鏡結(jié)果證實(shí)了超聲輔助法對(duì)杭白菊細(xì)胞壁的破壞程度大，胞內(nèi)多糖溶出最多。木瓜蛋白酶法除去多糖中蛋白成分，超聲輔助提取法蛋白質(zhì)脫除率和多糖保留率均很高，分別為78.93％和68.42％。因此，超聲波輔助提取為杭

4、白菊多糖最佳提取方法。
　　2.杭白菊多糖理化性質(zhì)的研究結(jié)果表明:三種方法獲得的多糖均易溶于水，不溶于有機(jī)溶劑，且由中性糖、糖醛酸和蛋白質(zhì)組成，其中熱水浸提多糖和堿液浸提多糖以中性多糖為主，糖醛酸含量分別為1.60％和1.08％，而超聲輔助提取溶多糖以酸性多糖為主，糖醛酸達(dá)到7.03％。乳化性和乳化穩(wěn)定性結(jié)果表明，三種方法提取多糖的乳化性均受多糖濃度、鹽離子濃度和pH的影響，且差異顯著。掃描電鏡顯示熱水浸提多糖表面平整光滑，超聲波

5、輔助多糖和堿液浸提多糖表面粗糙，凹凸不平且伴有空洞。
　　3.杭白菊多糖體外生理活性的研究結(jié)果表明:杭白菊多糖均呈現(xiàn)一定的體外抗氧化活性?？傔€原能力分析顯示，當(dāng)多糖質(zhì)量濃度達(dá)到1.0mg/mL時(shí)，超聲輔助提取多糖和堿溶液浸提多糖還原能力達(dá)到最大，分別為62.30％和47.87％，清除效果顯著優(yōu)于同一濃度的熱水浸提多糖;超聲輔助提取多糖和熱水浸提多糖清除DPPH自由基IC50為0.30mg/mL和0.59mg/mL，而堿液浸提多糖清

6、除能力很弱。三種方法提取多糖均具有清除羥自由基和超氧陰離子自由基能力，但均小于Vc的清除能力。利用三種方法提取多糖抑制α-葡萄糖苷酶活性分析降血糖活性結(jié)果表明，熱水浸提多糖和超聲輔助提取多糖均呈現(xiàn)一定的體外降血糖活性，其IC50分別為0.70 mg/mL和0.58mg/mL，而堿溶液浸提多糖不具有體外降血糖活性。抑制ACE活性分析降血壓結(jié)果表明，三種方法提取多糖均不具有體外降血壓活性。通過多糖結(jié)合膽酸鹽的能力，判斷降血脂效果結(jié)果表明，杭