果糖聯(lián)合酵母誘導(dǎo)大鼠高尿酸血癥模型及其尿酸代謝機制研究.pdf

1、目的：隨著近年來高尿酸血癥患病率的持續(xù)升高，高尿酸血癥動物模型的建立更加引起了重視，但其造模方法尚未有統(tǒng)一定論，現(xiàn)有的動物模型仍然存在一定的問題。故本研究擬采用酵母和果糖聯(lián)合的新型造模方法誘導(dǎo)大鼠建立高尿酸血癥模型，觀察其對大鼠持續(xù)性高尿酸血癥形成的影響；通過對尿酸代謝途徑的研究，初步探討果糖聯(lián)合酵母維持大鼠高尿酸水平的機制。
　　方法：選用雄性Wistar大鼠50只，按體質(zhì)量隨機分為五組，每組10只，分別為對照組、酵母組、果糖組

2、、酵母氧嗪酸鉀組（高尿酸血癥傳統(tǒng)模型組）、酵母果糖組。對照組與果糖組給予普通大鼠顆粒飼料喂養(yǎng)，其他三組給予質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.2酵母飼料喂養(yǎng)；果糖組與酵母果糖組大鼠給予10%果糖飲水，其他三組給予自來水；酵母氧嗪酸鉀組予以500mg/(kg· d)氧嗪酸鉀灌胃。分別在第2、4、6、8周末剪尾取血，測定各組血清尿酸（SUA）、血清尿素氮（BUN）、血清肌酐（SCr）水平。在第8周末時，收集24h尿液，測定尿中尿酸（UUA）、肌酐（UCr），計算尿

3、酸清除率(CUA)和肌酐清除率(CCR)。干預(yù)8周后，處死大鼠，檢測血清及肝勻漿中腺苷脫氨酶（ADA）和黃嘌呤氧化酶（XOD）活性，并觀察腎臟組織學(xué)病理切片。采用Western blotting檢測大鼠腎臟有機陰離子轉(zhuǎn)運子1（OAT1）、腎臟尿酸鹽轉(zhuǎn)運體（RST）、葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白9（GLUT9）的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：實驗第2、4、6、8周末，酵母果糖組大鼠血清SUA水平分別達(dá)到345.9μmol/L，403.7μmol/L，

4、447.2μmol/L和451.4μmol/L；與對照組相比分別升高了66.5%、33.8%、37.5%和69.8%（P值均＜0.05）；而酵母氧嗪酸鉀組（傳統(tǒng)模型組）大鼠SUA水平與對照組相比也顯著升高（P值均＜0.05），分別在實驗第2、4、6、8周末升高了28.8%、54.4%、39.4%和75.1%，顯示造模成功。在第2周末，酵母果糖組大鼠SUA水平與酵母組、果糖組、酵母氧嗪酸鉀組相比顯著升高（P值均＜0.05），分別升高了31

5、.7%、52.9%、29.3%，顯示酵母果糖組SUA升高最快；在第8周末，酵母果糖組與酵母氧嗪酸鉀組大鼠SUA水平分別是對照組的2.24倍、2.17倍，顯示果糖具有氧嗪酸鉀類似的促進(jìn)血清尿酸升高的作用。與嘌呤代謝相關(guān)的XOD和ADA活性分析顯示，酵母果糖組大鼠血清和肝勻漿中 XOD活性分別達(dá)到46.3U/L和10.4U/L，明顯高于空白對照組（38.2U/L和7.7U/L，P值均＜0.05）；而ADA活力也分別達(dá)到26.8U/L和15.

6、3U/L，顯著高于對照組（19.5U/L和11.1U/L，P值均＜0.05）。與對照組相比，酵母果糖組大鼠24h尿量明顯增加，CUA明顯降低（P值均＜0.05）。腎臟病理組織學(xué)分析顯示，在第8周，酵母果糖組大鼠腎小管管腔間質(zhì)偶見結(jié)晶物沉積，無明顯纖維化，腎小管、腎小球組織結(jié)構(gòu)無明顯異常；酵母氧嗪酸鉀組大鼠腎臟偶見間質(zhì)片灶狀單核淋巴細(xì)胞浸潤，無明顯纖維化改變。Western blotting結(jié)果顯示，與對照組相比，酵母果糖組大鼠腎臟OAT