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文檔簡介
1、該文利用RT-PCR技術(shù)克隆了大豆α-半乳糖苷酶cDNA,設計并合成帶有EcoRI酶切位點的5'端引物進行PCR,產(chǎn)物與畢赤酵母表達載體pPIC9連接構(gòu)建大豆的基因重組α-半乳糖苷酶表達質(zhì)粒,以相似的方法構(gòu)建基因重組人α-半乳糖苷酶表達質(zhì)粒.基因重組的大豆α-半乳糖苷酶可在畢赤酵母中高效分泌表達,表達產(chǎn)物通過離子交換層析進行純化;而基因重組的人α-半乳糖苷酶表達量相對較低,產(chǎn)物經(jīng)硫酸銨沉淀和凝膠過濾層析進行純化.通過對大豆、咖啡豆、人α
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