黃瓜α-半乳糖苷酶基因克隆及表達分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、黃瓜以水蘇糖作為體內同化物的主要運輸形式，其果實中卻只含有蔗糖、葡萄糖和果糖。經韌皮部遠距離運輸而來的水蘇糖到達庫器官后，如何卸載并轉化為蔗糖這一生理學過程一直不明。在組織、細胞、亞細胞水平上研究水蘇糖分解為蔗糖過程中的關鍵酶—α-半乳糖苷酶(EC3.2.1.22)的時空表達模式可為解決該問題提供重要線索。而要進行這些研究，就必須首先獲得黃瓜α-半乳糖苷酶的基因序列，才能根據這些序列，合成探針、引物或設計RNA干擾開展后續(xù)工作。

2、 為此，本實驗根據其他物種中α-半乳糖苷酶序列的保守區(qū)段設計引物，綜合運用反轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)和快速擴增cDNA末端(RACE)等技術，發(fā)現并克隆了4種黃瓜α-半乳糖苷酶的全長cDNA序列，分別命名為：黃瓜酸性α-半乳糖苷酶Ⅰ(DQ320569)、黃瓜酸性α-半乳糖苷酶Ⅱ(DQ361277)、黃瓜堿性α-半乳糖苷酶Ⅰ(DQ157703)和黃瓜堿性α-半乳糖苷酶Ⅱ(DQ395330)。這項工作使黃瓜成為迄今為止發(fā)現并克隆α

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