益生菌發(fā)酵與活性保藏的基礎研究.pdf

1、抗生素的發(fā)現給人類的生產、生活帶來了巨大變化。但從上世紀40年代，隨著抗生素作為飼料添加劑的廣泛應用，其種種弊端也逐漸被人們所認識。比如導致動物胃腸道正常菌群失調，產生耐藥性和藥物殘留等副作用，給動物和人類的健康帶來很大了危害。于是，國內外許多學者日趨關注和尋找能夠克服上述弊端的抗生素替代物，益生菌的研究開發(fā)便隨之引起各國的重視。 該文從市售益生菌產品中分離篩選得到乳酸菌和酵母菌的優(yōu)良菌株，從微生物保藏機構購買霉菌。通過對菌株單

2、獨發(fā)酵特性和保藏條件的研究，確立各種菌株的優(yōu)化增殖培養(yǎng)條件以及適合的保藏方法，為乳酸菌、酵母菌和霉菌在益生菌中的配伍使用提供應用依據。 實驗對樣品進行分離篩選，得到一株乳酸菌和酵母菌(編號為Lact.2和Y2)，經過形態(tài)學和生理生化實驗，鑒定為嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)和梨生布勒擲孢酵母(Bullerapiricola)。 對嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)、梨生布勒擲孢酵母(Bullerapiri

3、cola)和米曲霉As3.800的發(fā)酵特性進行研究，確立了生長的最佳培養(yǎng)基、pH、溫度。嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)的培養(yǎng)條件為：蔗糖2％，酵母膏0.5％，大豆蛋白凍0.5％，檸檬酸三銨0.2％，吐溫800.1％，K2HPO40.2％，CH3COONa0.5％，MnSO4·4H2O0.025％，MgSO4·7H2O0.058％，pH6.00，35℃；梨生布勒擲孢酵母(Bullerapiricola)為：葡萄糖1％，酵母膏0.

4、3％，大豆蛋白胨0.5％，麥芽汁0.3％，pH5.50，30℃，150r.min-1；米曲霉As3.800為：可溶性淀粉3％，酵母膏0.3％，NaCl0.05％，MgSO4·7H2O0.05％，FeSO40.001％，K2HPO40.1％，pH6.00，30℃，150r.min～。在此培養(yǎng)條件下，乳酸菌活菌數為9.0×109CFU.mL-1，酵母菌活菌數為2.0×109CFU.mL-1，霉菌生物量為19.22mg.mL-1。 對

5、嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)、梨生布勒擲孢酵母(Bullerapiricola)和米曲霉As3.800代謝產物對菌體生長的影響進行了研究，在實驗條件下，代謝產物基本不影響菌體的生長；對三種菌進行了共培養(yǎng)的初步研究，在厭氧條件下，乳酸菌生物量較高，酵母菌和霉菌生物量較低。鑒于益生菌應用中，乳酸菌的功效占主導地位，酵母菌和霉菌起輔助營養(yǎng)作用，因此，乳酸菌、酵母菌和霉菌的復配使用基本可行。 對乳酸菌和酵母菌進行了液態(tài)保藏的

6、研究發(fā)現，低pH值環(huán)境加快菌體的消亡，中性pH值更適合菌體的存活；凍干保藏的研究表明，10％蔗糖溶液對嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)的凍干保護效果最好，10％可溶性淀粉對梨生布勒擲孢酵母(Bullrapiricola)的凍干保護效果最好；一定濃度范圍內，保護劑濃度的升高會增加對菌體細胞膜的保護面積，保護效果也隨之增加。 通過分離出優(yōu)良菌株，進行高密度培養(yǎng)，尋找有效的保藏方法，是微生態(tài)制劑產業(yè)的主要思路和技術關鍵點。該文